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BIM分享:關於酶聯免疫試劑盒實驗的操作流程描叙

  • 發布日期:2017-04-27      浏覽次數:2161
    •    昨天上午我司吳在詢盤的留言上看到有客戶咨詢關於(yú)實驗正確(què)步驟是怎樣的?在經過一番交流後,我司吳特意整理出實驗中的整個操作流程及注意事項與親們分享:


      一、前期準備工作:
         實驗前樣本和試劑盒室溫平行1小時,如果樣本是凍存樣本,應提前拿到2-8攝氏度進行解凍(不建議直接室溫解凍)
         準備好實驗所需耗材,蒸餾水(去離子水)。

                     
      二 、操作流程描叙:

      1,将要進行實驗的版孔進行設定好,标準品5個點,每個點設定平行,需要用到10個孔 ,空白隻需1個孔。剩下孔可以做爲樣本孔。
      2,稀釋标準 ,準備好5個EP管,然後在每個EP管中加入150微升标準稀釋液,編上編碼,分别爲1,2,3,4,5,在1号管中加入150标準品,用槍頭反複吹打10次左右(注意控制幅度不要過大容易産生氣泡)如果有渦旋儀可以在渦旋儀上渦旋5秒左右,然後換槍頭 ,在1号管中取150微升加入到2号管,後面過程一次類推。zui後稀釋完,前面4個管中每管液體在150微升,5号管爲300微升。濃度是從大到小。
      3,标準、樣本、空白加樣:标準是每個濃度點2個孔(做平行),每孔加入50微升,加樣過程中注意換槍頭 ,樣本孔中每孔加入50微升,加樣過程中注意換槍頭,空白孔加入50微升蒸餾水。特别要說明的是,标準加樣和樣本加樣盡量控制在15分鍾内加完,如果時間拖的太長,會導緻前面孔先反應後面孔才開始反應,這樣數值偏差過大。加完樣後蓋上封闆膜,至37攝氏度孵育30分鍾.
      4,洗版,在孵育過程中可以将洗滌液配好,20ml30倍濃縮洗滌液用蒸餾水或者去離子水定容到600ml即可。每孔加入250-300微升的洗滌液(不要漫過版孔),(如果有震蕩儀的話 ,可以講闆子放入震蕩儀上5秒左右,然後靜止三十秒,沒有請忽略次過程)将闆子在桌子上晃動5秒左右,然後靜置30秒,甩幹,拍闆 。說明:甩幹過程盡量要快,1秒内就可以完成,不要慢慢傾斜倒掉液體,直接翻闆甩掉液體即可。拍闆過程需要在桌子上墊一層吸水紙或者濾紙,版孔朝下拍幾下,拍幹區别主要看吸水紙和濾紙上沒有明顯的水漬爲完成。
      5,每孔加入50微升的酶标試劑,此處在空白孔中不需要加(空白孔爲空),孵育30分鍾。
      6,洗版同步驟4
      7,顯色,先每孔中加入50微升的顯色A液,然後每孔中加入50微升顯色B液 。避光37攝氏度顯色15分鍾
      8,終止,每孔加入50微升的終止液,注意,加完終止液必須在15分鍾内讀數,超過時間讀數無效。在規定時間内讀數都是有效的。

      至此,整個實驗結束。

       

         需要額(é)外提醒的是:在做完整個實驗過儀器之前,儀器預熱半小時 ,這個計算好時間,也可以直接将儀器一直開著(zhe),直到整個實驗結束。


        在加液過程中不要使槍頭觸及到闆子底部,一般槍頭都懸空,可以将槍頭靠在孔邊(biān)緣,但槍頭尖懸空,如果槍頭上殘(cán)留液體看整體多少量,不要吹打下去。特别忌諱在版孔内壁流向版孔。整個加液過程不要産生氣泡。(洗滌液除外)

       

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