ELISA實驗中可能影響結果的原因及解決方法

 

樣品收集和保存：
   用於ELISA測定zui常用的标本是血清（漿）。要注意避免嚴重溶血，因爲血紅蛋白中含有具有類似過氧化物活性的血紅素基團，在孵育時很容易吸附於固相，與HRP底物反應産生假陽性。
   樣品採集及血清分離中要注意避免細菌污染，一方面細菌分泌的酶可能對抗原抗體等蛋白産生分解作用，另一方面，細菌的内源性酶如大腸杆菌的β-半乳糖苷酶會對相應酶作标記的測定方法産生非特異性幹擾。
   樣品應該要避免反複凍融。因反複凍融所産生的機械剪切力對标本中的蛋白等分子産生破壞作用，從而引起假陰性結果。另外，樣品混勻時，不要劇烈振蕩
，反複颠倒混勻即可
。
   一般而言，如果在收集樣品的當天進行檢測，可将樣品及時儲存在4℃備用；而對隔天再檢測的樣本，應及時分裝後凍存在-20℃備用，若要長期保存樣品，将其置於-70℃凍存。



 

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