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一、添加劑的添加
1.溫度的掌握：卵黃和抗生素類添加的溫度都不應太高。
2.定量：過多會抑制一些目标菌，太少又導緻雜菌的過度生長。
二 、培養溫度的掌握
1.真菌類：25-28℃培養
2.細菌類：李氏菌在增菌和生化中要求培養溫度在30℃左右 。
3.其他一般在36℃左右
三、接種方法
常用的方法主要有劃線、三點接種 、穿刺接種、傾注接種、塗布接種、液體接種。
四 、革蘭氏染色方法
染色時間的掌握、沖洗的方法
五、劃線獲得單個菌落的方法 ，劃不出單個菌落的原因
1.平闆上有過多的水分；
2.劃線時接種環未經反複灼燒。
3.多區劃線，三區或四區劃線。
六、塗布和傾注的區别
1.塗布利於觀察，但由於塗布棒上會帶有少量的菌液，影響計數的準確性。
2.塗布更爲準確，但不利於觀察菌落的狀态 。
七、培養基配制時應注意的問題
1.滅菌溫度要嚴格控制，按照要求滅菌 ，尤其含糖量較高的培養基溫度不應太高，過高會導緻糖分焦化，影響質量 。
2.瓊脂培養基不能反複溶化。反複溶化會破壞培養基中的營養成分 。
3.培養基不能反複滅菌，反複滅菌也會導緻營養成分的破壞。
4.含瓊脂的培養基滅菌後，要搖勻。
八、闆的保存
大多數平闆如VRBA、DC、尿素酶生化管、顯色系列等要避光低溫保存。
九、産品的保存
1.幹粉培養基：避光幹燥，結塊後不能使用。
2.亞碲酸鉀卵黃增菌液、50%卵黃乳液等 ：冷凍保存，使用時，要常溫解凍，避免水浴加熱。
3.抗生素類 ：冷藏保存，溫度過高會導緻靈敏度的下降。
4.兔血漿：冷藏保存少量的紅色不會影響結果。
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