今天給(gěi)大家講解下酶聯免疫實驗整個(gè)操作流程的詳細解析，精彩内容一起來看看吧！
實驗前準備：将樣本和試劑盒室溫平行1小時，如果樣本是凍存樣本，應提前拿到2-8攝氏度進行解凍（不建議直接室溫解凍）
自備材料：蒸餾水（去離子水）
操作流程 ：
1.将要進行實驗的版孔進行設定好，标準品5個點，每個點設定平行，需要用到10個孔，空白隻需1個孔，剩下孔可以做爲樣本孔 。
2.稀釋标準：準備(bèi)好5個EP管 ，然後在每個EP管中加入150微升标準稀釋液，編(biān)上編(biān)碼，分别爲1，2，3，4,5，在1号管中加入150标準品，用槍頭反複吹打10次左右（注意控制幅度不要過大容易産生氣泡）如果有渦旋儀可以在渦旋儀上渦旋5秒左右 ，然後換槍頭 ，在1号管中取150微升加入到2号管，後面過程一次類推。zui後稀釋完，前面4個管中每管液體在150微升，5号管爲300微升 。濃度是從大到小。
3.标準、樣本、空白加樣：标準是每個濃度點2個孔（做平行），每孔加入50微升，加樣過程中注意換槍頭，樣本孔中每孔加入50微升，加樣過程中注意換槍頭，空白孔加入50微升标準稀釋液或者樣本稀釋液。特别要說明的是 ，标準加樣和樣本加樣盡量控制在15分鍾内加完 ，如果時間拖的太長(zhǎng) ，會導(dǎo)緻前面孔先反應後面孔才開始反應，這樣數值偏差過大。加完樣後蓋上封闆膜，至37攝氏度孵育30分鍾。
4.洗版 ：在孵育過程中可以将洗滌液配好 ，20ml30倍濃縮洗滌液用蒸餾水或者去離子水定容到600ml即可。每孔加入250-300微升的洗滌液（不要漫過版孔），（如果有震蕩(dàng)儀的話，可以講闆子放入震蕩(dàng)儀上5秒左右 ，然後靜止三十秒，沒有請忽略次過程）将闆子在桌子上晃動5秒左右，然後靜置30秒，甩幹，拍闆。說明：甩幹過程盡量要快，1秒内就可以完成，不要慢慢傾斜倒掉液體，直接翻闆甩掉液體即可 。拍闆過程需要在桌子上墊一層(céng)吸水紙或者濾紙，版孔朝下拍幾下，拍幹區别主要看吸水紙和濾紙上沒有明顯的水漬爲完成 。
5.每孔加入50微升的酶标試劑(jì)，此處(chù)在空白孔中不需要加（空白孔爲空），孵育30分鍾。
6.洗版同步驟4。
7.顯色，先每孔中加入50微升的顯色A液，然後(hòu)每孔中加入50微升顯色B液 。避光37攝(shè)氏度顯色15分鍾。
8.終止，每孔加入50微升的終止液，注意，加完終止液必須在15分鍾内讀(dú)數，超過時間讀(dú)數無效。在規(guī)定時間内讀(dú)數都是有效的 。
9.至此，整個實驗結束
注意事項：
1.在做完整個實驗過儀器之前，儀器預熱半小時，這個計算好時間，也可以直接将儀器一直開著，直到整個實驗結束 。
2.在加液過程中不要使槍頭觸及到闆子底部，一般槍頭都懸空，可以将槍頭靠在孔邊(biān)緣，但槍頭尖懸空，如果槍頭上殘(cán)留液體看整體多少量，不要吹打下去。特别忌諱在版孔内壁流向版孔。整個加液過程不要産生氣泡。（洗滌液除外）
3.公司提供技術(shù)支持，如您有疑問，可前來(lái)咨詢我司技術(shù)人員。
恒遠由資深專家帶(dài)頭組建研發團隊，十幾年酶聯免疫試劑盒開發經驗，品質保障，值得信賴。研研究已進入全新時代，愛(ài)好生物研究的學者越來越多。不管您是花幾百還是上千，甚至上萬去購置試劑，這都是zui簡單的步。您之後需要付出更多的是大量的時間和精力，再加上您的耐心和用心，才有可能把這條路走的更遠。
點擊交流