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細胞株培養,您會嗎?

  • 發布日期:2019-03-06      浏覽次數:1978
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          細胞株是用單(dān)細胞分離培養或通過篩選的方法,由單(dān)細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質或标志必須在整個培養期間始終存在。國内資shen的細胞株是通過選擇法或克隆形成法從(cóng)原代培養物或細胞系中獲得的具有特殊性質或标志的培養細胞。

          細胞株培養技術的三大要點:

          一、取材
          細胞株培養的材料主要來源於外科手術或活檢瘤組織,取材時避免用壞死組織,要挑選瘤細胞集中和活力較好的部位,瘤性轉移淋巴結或胸腹水是較好的培養材料。取材後盡快培養,因故不能立即培養者,可凍存。細胞株的培養方法及凍存方法同前述正常組織。

          二、成纖維細胞排除
          在細胞株培養中常混雜有一些成纖維細胞,培養時能與瘤細胞同時生長,並常壓過癌細胞,導緻癌細胞生長受阻以至消失,應仔細排除。排除方法常有:機械刮除法、反複貼壁法、消化排除法、膠原酶消化法等 。

          三、提高細胞培養存活率和生長率
          根據實驗經驗 ,細胞株要經過對新環境的适應才能生長,因此不能局限於一般培養法,須採用一些特殊措施。如:用适宜底物,鼠尾膠原底層及飼細胞底層等。用細胞生長因子,根據細胞種類不同選用不同的促細胞生長因子,如胰島素、雌激素等。也可以考慮動物媒介培養。

          總而言之,在細胞株待轉化細胞數量明顯上升,並(bìng)出現細胞團塊後,可轉入細胞培養瓶中,加培養基,常溫培養半個月,一般每隔一周觀察一次,決定是否換液、傳代,靠譜的細胞株的每個步驟都至關重要。細胞生長(zhǎng)達一定數量後凍存,凍存前應進行核型分析和存檔。

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