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ELISA實驗加樣防錯小竅門

  • 發布日期:2019-04-02      浏覽次數 :2244
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          ELISA加樣時的防錯(cuò)小竅門(mén)

          (1)用一張寫滿字的紙,字越多越好,比如報(bào)紙,墊在下面,這樣,加過标本的小孔看過去下面的字會變(biàn)小,沒加的字正常,非常容易區分。

          (2)可以利用液面反光與沒(méi)有加的孔加以區(qū)别 。

          (3)在标本加完後(hòu),再把加樣槍全壓下,使液面産(chǎn)生小氣泡,也可以加以區分。

          實(shí)驗常見(jiàn)問題解析

          問:做間接Elisa法測試小鼠血清中的IgE抗體,設空白對照、和陰性對照、陽性血清稀釋倍數爲5千、1萬、10萬、20萬不等,用的是生物素标記的羊抗鼠IgE抗體,和親和素的辣根過氧化物酶。可是結果除瞭空白對照孔沒有顔色外 ,其餘各孔全有顔色,而且OD值都相差不大,爲什麽?

          答:可能原因如下: 
          (1) 水質被金屬離子等污染;防止辦法盡量使用新鮮水或蒸餾水。
          (2) 洗滌不充分,樣品中其它成分殘留或酶殘留;防止辦法洗滌液應注滿微孔,充分洗滌。
          (3) 移液頭重複使用,未洗淨或消毒不*; 防止辦法移液頭一次性使用。
          (4) 酶标闆靈敏度過高。
          (5) 一抗顯色時間的控制等等 ,關於ELISA的每一步都要注意才行。

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