幹貨:細胞培養出現沉澱,什麽原因?

    細胞培養是實驗中的重中之重，細胞沒有培養好實驗記性不瞭(le)，細胞培養好瞭(le)，爲後面的實驗打下瞭(le)雄厚的基礎(chǔ)！那細胞在培養中出現瞭(le)沉澱，什麽原因造成的呢？您知道嗎？好瞭(le)，不賣關子瞭(le)，恒遠邀您一起來看看！

    細胞培養中的沉澱

    如果排除瞭(le)污染，細胞培養基中的渾濁通常被解釋爲金屬、蛋白和其他培養基組分的沉澱。沉澱物可能損害細胞健康，因爲他們通過螯合可移除養分和其他需要的組分，從而改變(biàn)培養基的組成。沉澱物也是顯微鏡可見的，可能會幹擾依賴成像的實驗分析。

    産生沉澱的可能原因

    一、溫度變化

    在細胞培養中
，溫度是引起沉澱的主要因素之一。當遭遇溫度的變(biàn)化時，高分子量血漿蛋白會從溶液中析出；熱失活和凍融循環能促進蛋白降解和沉澱；因爲液體或重組成培養基在使用之間保持冷藏儲(chǔ)存，鹽可能沉澱，尤其是10x或其他濃縮的儲(chǔ)存液。

    二、失水誘導的濃度改變

    如果培養基可能蒸發(fā)，培養基組分(包括鹽) 的濃度将會增加，特别是培養基表面可能容易形成晶體沉澱(diàn)。

    三、鈣鹽

    制備(bèi)無血清培養基時，組分添加的順序可能導緻不可溶分子的形成。鈣鹽尤其容易沉澱，比如CaCl2和MgSO4在溶液中反應産(chǎn)生CaSO4晶體。高壓滅菌和pH值不穩定會加劇這一問題。

    四、金屬補充物

    銅、鐵和鋅等金屬離子是細胞生長所必需的，是無血清培養基的重要補(bǔ)充物。培養系統中其他血清組分的缺失可能導緻這些金屬沉澱，爲細胞形成有毒的環境。在較高pH環境下(一般>8時)，碳酸鹽和氫氧根離子與銅離子、磷酸鹽和氫氧根離子與鐵離子、碳酸鹽、磷酸鹽和氫氧根離子與鋅離子、氫氧根離子與鎂離子易形成不溶性沉澱物；在氧化條件下，銅和鋅更易於(yú)沉澱。



    五、污染

    培養物渾(hún)濁可能是細(xì)菌或真菌污染造成的。

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