現在市面上的ELISA試劑盒既有國産也有進口，數量繁多令人目不暇接 ，而且質量也是參(cān)差不齊，今天我們講講怎樣才能選出zui适用的産品呢？首先要根據我們所要檢測(cè)的分子進行檢測(cè)，除此以外也還有一些需要加以考量的因素 ，下面就爲大家提供幾點參(cān)考 。
一、實驗類型
ELISA試劑盒有多種類型，不過它們都有一個共同特點，就是進行抗原捕獲。一般捕獲形式包括将抗原吸附到微孔闆或者用微孔闆上的抗體進行捕獲。In-cell ELISA和酶聯免疫斑點ELISPOT是兩種特殊的類型，In-cell ELISA需要将微孔闆中培養的細胞進行固定和通透化，然後再用抗體原位檢測(cè) 。ELISPOT有點像蛋白印迹Western blot，先在帶(dài)膜的微孔闆中培養細胞，ELISA試劑盒然後在膜上檢測(cè)細胞分泌的抗原形成斑點 。此外 ，我們還需要根據自身需要選擇96孔闆或是384孔闆進行ELISA實驗。
通常人們使用雙抗夾心法進行ELISA實驗，雙抗夾心法中抗原被夾在捕獲抗體和檢測抗體之間，這種方法既靈敏又有效，受到瞭許多研究者的青睐。不過有時候雙抗夾心法並(bìng)不是*選擇，例如有時候抗原特别小讓兩個大抗體難以附著(zhe) ，又或者抗體隻有一個抗體結合位點。在上述情況下 ，競争性ELISA就更爲适用 ，這種方法是採用帶标記的純化抗原與樣本中無标記的抗原進行競争，以結合捕獲抗體。
二、抗體類型
單克隆抗體和多克隆抗體都能夠用於(yú)ELISA，實際上有時候二者結合效果更好。例如，對於(yú)雙抗夾心法而言，用多抗進行捕獲而單抗進行檢測有時更有幫助。多抗能夠確(què)保捕獲所有抗原，随後單抗再特異性檢測擁有特定抗原表位的抗原。
雙抗夾心法ELISA中捕獲抗體與檢測抗體（不論多抗還是單抗）的配對很有講究。我們不希望捕獲抗體與檢測抗體競争抗原上的同一位點，爲此我們就需要確(què)保捕獲抗體和檢測抗體所識别的抗原表位不存在重疊 。如果捕獲抗體和檢測抗體之間發生瞭(le)沖突，就會對實驗結果産生較大影響。要避免這一問題 ，我們可以選擇購買“matched pair”的捕獲/檢測抗體對 ，這些打包在一起的抗體是商家經過驗證才推薦的好組合。
三、交叉反應。
如果抗體間發生沖突或交叉反應就會影響整個實驗的特異性。其中抗體來源所帶來的兼容性就是交叉反應的一個因素。盡管現在購買源自動物的抗體越來越容易 ，我們仍有必要確(què)認一下是否會産生交叉反應的問題 。在用雙抗夾心法進行ELISA檢測(cè)時，檢測(cè)用的二抗必須特異性針對檢測(cè)一抗，而不能與捕獲抗體起反應。如果檢測(cè)用二抗與捕獲抗體結合，實驗特異性就會大打折扣。通常我們選用源自不同宿主的捕獲抗體和檢測(cè)一抗，來避免上述問題。
與此同時，瞭(le)解試劑盒中提供的buffer也是有必要的（例如washing buffer和blocking buffer），以免這些buffer含有可能影響抗原抗體相互作用的組分，使檢測(cè)結果收到影響。
四、檢測方式
如今檢測(cè)ELISA有許多途徑，我們可以根據自己的偏好進行選擇。一般ELISA檢測(cè)的是酶促反應的可溶性産(chǎn)物，抗體上結合有相應的酶（例如通常使用的辣根過氧化物酶HRP），而反應體系中添加有相應的底物（如3，3-二氨基聯苯胺DAB）。這種酶促反應生成具有特征性的顔色，可以通過分光光度計進行檢測(cè)，堿性磷酸酶AP也是一種常用酶。酶可以結合在一抗上，也可以結合在二抗上，還可以使用鏈黴親和素标記的酶與親和素标記的一抗結合。此外ELISA的結果檢測(cè)還包括放射性檢測(cè) 、熒光檢測(cè)、化學發光或顯色法檢測(cè)等。
上述四點涵蓋的問題就已經很多瞭(le)，如果您對考慮購買的ELISA試劑盒還有任何疑問，都可以直接向我們咨詢。我們的網站上也有相應的技術資料提供，可以從中獲取有價值的産(chǎn)品信息。
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