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收到細胞改如何處理呢?

  • 發布日期:2022-08-10      浏覽次數:1730
    • 收到細胞改如何處理呢?很多人收到細胞的第一步處理方法就錯瞭!一個不小心後面的實驗都會受到影響,那麽正確的方法應該怎麽做呢,今天恒遠小編給大家總結收到細胞正確的處理方法。


      1. 首先,觀(guān)察細胞培養瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾(hún)濁等現象 。

      2. 用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀态。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量叢(cóng)瓶壁脫落;先不要打開培養瓶蓋,将細胞置於(yú)細胞培養箱内趨置培養2-4小時,以便穩定細胞狀态。

      3. 仔細閱讀細胞說明書,瞭(le)解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形态、所用基礎(chǔ)培養基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等 。

      4. 靜置完成後,取出細胞培養瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀态;建議細胞傳(chuán)代培養後,定期拍照、記錄細胞生長(zhǎng)狀态。

      5. 貼壁細胞:若細胞生長(zhǎng)密度超過80%,可正常傳(chuán)代;若未超過80%,移除細胞培養瓶内培養基,預留5m左右繼續培養,直至細胞密度達80%左右再進行傳(chuán)代操作,瓶蓋可稍微擰松。

      6. 懸浮細胞:将細胞培養瓶内液體全部轉移至50ml無菌離心管内,1200rpm離 心5min,離心後上清培養基可收集備(bèi)用,管底細胞沉澱加入5m培養基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可将細胞懸液分至2個細胞培養瓶内培養,補(bǔ)加培養基至5ml;若細胞密度未超過80%,将細胞懸液移至原瓶繼續培養,直至細胞密,度達80%左右時再進行傳代操作。


      溫馨提醒:

      可将培養瓶内多餘的培養基轉移至50ml無菌離心管中備(bèi)用;細胞傳代時,可以将該培養基按照一定比例和客自備(bèi)的培養基混合使用,讓細胞逐漸适應培養條件。確(què)認細胞狀态良好後,應及時将部分細胞凍存,再進行後續的實驗,避免後期實驗失誤可能發生細胞污染或死亡而導緻的細胞丢失,影響後續實驗。


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