ELISA實驗原理簡單，步驟少，流程短 ，試劑盒操作相對簡便，實驗小白也能輕松上手。然而，實驗上手雖快，想要得到可靠的實驗結果 ，卻並(bìng)不那麽容易。爲瞭(le)更好地助力科研實驗 ，恒遠生物在這裏将大家關心的ELISA試劑盒實驗的常見問題整理如下 ：
一、關於試劑盒：
1.你們的ELISA試劑(jì)盒能檢測(cè)什麽物種？
目前我們的試劑盒檢測(cè)的種屬主要爲人、小鼠、大鼠、猴、兔、豬 、雞 、植物等，種屬齊全。如果試劑盒的命名帶有特定指向（如人），代表專門針對此物種；沒有指明物種，則代表該試劑盒在目前公司産品涉及的種屬（例如人 、小鼠、大鼠、猴、兔等）内通用；其他特殊種屬的檢測(cè)适用性，請聯系技術支持確(què)認。
2.96TELISA試劑盒能檢測(cè)多少樣本？是否需要做複(fù)孔？
爲瞭(le)保證實驗結果的準確性，我們建議标準品和樣品都做複孔，但並(bìng)不強行要求ELISA實驗一定要做複孔/3複孔 ，客戶可根據自己的需求設定複孔實驗，具體實驗情況可咨詢恒遠生物技術指導。
3.需檢(jiǎn)測(cè)的樣品較多，能否減少标曲的孔數？
爲保證結果的準確(què)度，不建議減少标曲的孔數 ，請確(què)保能夠檢測(cè)至少6個不同的标準品濃度（含空白孔)。
4.ELISA試劑(jì)盒要使用多次 ，但樣本較(jiào)多 ，是否可以隻做一次标曲？
雖然ELISA實驗的操作步驟相同，但每次實驗的各種影響因素都會有所變化。所以 ，每次實驗時，都必須重新繪制标準曲線 ，以得到更準確(què)可靠的檢測結果 。如果需要做多次實驗，溶解後的高濃度标準品可以分裝保存於(yú)-20℃條件下 ，避免反複凍融 ，半個月内使用有效。
二、關於樣本
1.血清血漿樣本應該(gāi)選用哪種真空採(cǎi)血管收集？
血清 ：不含抗凝劑的採(cǎi)血管/含促凝劑採(cǎi)血管（通常爲紅色、黃色、橘色管蓋(gài)的採(cǎi)血管）
血漿 ：含抗凝劑的採(cǎi)血管（通常爲綠色、紫色管蓋(gài)的採(cǎi)血管）
樣品收集後，若在1周内進行檢測，可保存於(yú)2-8℃條件下；若不能及時檢測，請按一次使用量分裝，凍存於(yú)-20℃條件下（1個月内檢測）或-80℃條件下（3個月内檢測），避免反複凍融 。檢測前，應緩慢融化冷凍過的樣本 ，並(bìng)離心除去凍融過程中産生的沉澱物。
2. 採(cǎi)集時，如何盡(jǐn)可能避免溶血現象？
溶血可由多種理化因素和毒素引起 。在體外，機械性強力振蕩、低溫冷凍等誘因均可引起溶血。爲避免溶血對檢測(cè)結果産(chǎn)生影響 ，應注意：
（1）靜脈採(cǎi)血時，回抽壓力不宜過(guò)大；
（2）一次性採(cǎi)血量不宜過(guò)少；
（3）採(cǎi)集的全血不宜激烈振蕩(dàng)；
（4）離心轉速不宜過大；
（5）收集的全血需盡快處(chù)理成血清/血漿，全血不能凍(dòng)融；
（6）若需要麻醉採(cǎi)血，需使用沒有溶血作用的麻醉劑(jì) 。
3.組織/細胞樣本收集中提到的“反複(fù)凍(dòng)融"，過程應該如何操作？
（1）組織樣本：組織研磨後，将其-80℃放置1h/液氮放置0.5h，再置於(yú)30℃水浴鍋中輕微振蕩(dàng)，使其迅速融化，反複操作1-2次即可；
（2）細胞樣本：按上述操作步驟，反複凍融2-3次。若爲膜蛋白，可以适當(dāng)做超聲處(chù)理，但需要控制好超聲的溫度、頻率；
4.怎樣判斷(duàn)我的樣本是否需要稀釋或做其他處(chù)理？
試劑盒的檢測範圍不等同於(yú)樣本中待測物的濃度範圍，建議實驗前通過相關文獻預估樣本中待測物的濃度，並(bìng)通過預實驗確定樣本的實際濃度情況。如果是常規樣本類型，可以咨詢ELISA技術支持，以獲取樣本的推薦稀釋倍數，並(bìng)安排預實驗檢測；如果樣品中待測物的濃度過高或過低，請對樣本做适當的稀釋或濃縮；如果樣本中的分析物濃度遠低於(yú)試劑盒的檢測限，建議選擇靈敏度更高的試劑盒來檢測。
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