胎牛血清在科研市場上應用廣泛相信大家都知道。但對於(yú)胎牛血清的使用及保存,並(bìng)不是所有人都那麽清楚,恒遠小編就以胎牛血清的儲存、常見問題及處理方法進行分析,建議收藏!
一、如何儲存和解凍血清才不會使産品質量受損?
未拆封的血清,一般情況下應存放於(yú)-10℃至-20℃,在産(chǎn)品規定的效期内均可使用,若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至合适大小的無菌離心管内,再放回冷凍。将血清從冷凍冰箱取出後,先置於(yú)2~8℃冰箱使之融解,然後在室溫下使之全融,或通過水浴鍋促使其溶解。但必須注意的是,融解過程中必須規則地搖晃均勻。溶解後建議盡快使用,若長時間儲存在2-8℃,血清中的各種(脂)蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能因凝集而形成沉澱或可見的混濁。
二、血清中絮狀沉澱,它們是什麽,怎麽處理?
1.将冷凍(dòng)保存的血清取出後,置4℃冰箱靜止過(guò)夜;
2.待血清融化後(hòu),上下颠倒,輕輕混勻,繼(jì)續4℃2-3小時;
3.輕(qīng)輕(qīng)吸取上層(céng)血清,分裝,餘底下50ml左右;
4.低速離(lí)心5分鍾,去掉沉澱(diàn)。
三、若解凍後發現有絮狀沉澱物出現,該怎麽處理?
胎牛血清中沉澱物的出現有許多種原因,但普遍的原因是由於胎牛血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在胎牛血清解凍後,也會存在於胎牛血清中,亦是造成沉澱物的主要原因之一。但這些絮狀沉澱物,並(bìng)不影響胎牛血清本身的質量。若欲去除這些絮狀沉澱物,可以将胎牛血清分裝至無菌離心管内,以400g稍微離心,上清液即可接著(zhe)加入培養基内一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉澱物,因爲它可能會阻塞您的過濾膜。
解凍胎牛血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若胎牛血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易産生沉澱物。解凍胎牛血清時,請随時将之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉澱的發生。請勿将胎牛血清置於(yú)37℃太久。若在37℃放置太久,胎牛血清會變得混濁,同時胎牛血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害,而影響胎牛血清的質量。胎牛血清的熱滅活非常容易造成沉澱物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做胎牛血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鍾的原則,並(bìng)且随時搖晃均勻。
四、如何避免血清中産生沉澱?
1.解凍(dòng)時,請(qǐng)随時将之搖晃均勻,使溫度及成分均一;
2.分裝凍(dòng)存時,須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡);
3.切勿由-20℃直接至37℃水浴鍋解凍(dòng),較大的溫差,易造成蛋白質凝結而發生沉澱(diàn);
4.切勿将血清置於(yú)37℃過長(zhǎng)時間,否則可能使之渾濁,其中一些不穩定的組分也會因此受到影響,終降低血清的品質;
5.血清的熱滅(miè)活非常容易造成沉澱(diàn)物的增多,若非必要,可以無須做此步驟;
6.若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鍾的原則,並(bìng)且保持搖晃均勻。溫度過高、時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉澱(diàn)物的增多。
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