Elisa間接法測抗體
間接法是檢測抗體zui常用的方法,其原理爲利用酶标記的抗抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體,故稱爲間接法。操作步驟如下:
(1)将特異性抗原與固相載體連接,形成固相抗原:洗滌除去未結合的抗原及雜質。
(2)加稀釋的受檢血清:其中的特異抗體與抗原結合,形成固相抗原抗體複合物。經洗滌後,固相載體上隻留下特異性抗體。其他免疫球蛋白及血清中的雜質由於不能與固相抗原結合,在洗滌過程中被洗去。
(3)加酶标抗抗體:與固相複合物中的抗體結合,從而使該抗體問接地标記上酶。洗滌後,固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。例如欲測人對某種疾病的抗體,可用酶标羊抗人IgG抗體。
(4)加底物顯色:顔色深度代表标本中受檢抗體的量。