您現在的位置:首頁 > 技術文章 > 恒遠生物|如何鑒定微生物

恒遠生物|如何鑒定微生物

  • 發布日期:2023-08-30      浏覽次數:1077
    •     微生物是對藥品原料、生産(chǎn)環境和成品造成污染的重要因素,也是造成生産(chǎn)失敗(bài)、成品不合格 、對人類造成危害的重要因素。所以分離得到的污染微生物,進行微生物鑒定 ,是十分必要的,也可爲檢驗和生産(chǎn)提供有效的依據。


      1、形态學特征


      (1)細胞形态

          在顯微鏡下觀察細胞外形大小、形狀、排列等,細胞構造,革蘭氏染色反應,能否運動(dòng)、鞭毛著(zhe)生部位和數目,有無芽孢和莢膜、芽孢的大小和位置,放線菌和真菌的繁殖器官的形狀、構造,孢子的數目、形狀、大小、顔色和表面特征等。


      (2)群體形态

      通常是指以下情況(kuàng)的特征:

      1)在一定的固體培養基上生長(zhǎng)的菌落特征:包括外形、大小、光澤、黏稠度、透明度 、邊(biān)緣、隆起情況、正反面顔色、質地、氣味、是否分泌水溶性色素等。

      2)在一定的斜面培養基上生長(zhǎng)的菌苔特征:包括生長(zhǎng)程度、形狀、邊(biān)緣、隆起、顔色等;在半固體培養基上經穿刺接種後的生長(zhǎng)情況 。

      3)在液體培養基中生長(zhǎng)情況:包括是否産(chǎn)生菌膜 ,均勻渾濁還是發生沉澱,有無氣泡,培養基的顔色等。如是酵母菌,還要注意是成醭狀、環狀還是島狀。


      2、生理生化反應特征

      (1)利用物質的能力

      包括對(duì)各種碳源利用的能力(能否以CO2爲唯1碳源、各種糖類的利用情況等)、對(duì)各種氮源的利用能力(能否固氮 、硝酸鹽和铵鹽利用情況等)、能源的要求(光能還是化能、氧化無機物還是氧化有機物等)、對(duì)生長(zhǎng)因子的要求(是否需要生長(zhǎng)因子以及需要什麽生長(zhǎng)因子等)。

      (2)代謝産物的特殊性

      這方面的鑒定項目非常多,如是否産(chǎn)生H2S、吲哚、CO2、醇、有機酸,能否還原硝酸鹽 ,能否使牛奶凝固 、凍(dòng)化等。

      (3)與溫度和氧氣的關系

      測(cè)出适合某種微生物生長(zhǎng)的溫度範圍以及它的zui适生長(zhǎng)溫度、zui低生長(zhǎng)溫度和zui高生長(zhǎng)溫度。對氧氣的關系,看它是好氧、微量好氧、兼性好氧、耐氧還是專性厭氧 。


      3、生态學特征

          生态學特征主要包括它與其他生物之間的關(guān)系(是寄生還是共生,寄主範(fàn)圍以及緻病的情況)。在自然界的分布情況(pH情況、水分程度等)、滲透壓情況(是否耐高滲、是否有嗜鹽性等)。


      4、血清學反應

          很多細菌有十分相似的外表結構或有作用相同的酶(如乳酸杆菌屬内各種細菌都有乳酸脫氫酶)。雖然它們的蛋白質分子結構各異,但在普通技術下(如電(diàn)子顯微鏡或生化反應),仍無法分辨它們。然而利用抗原與抗體的高度敏感特異性反應,就可用來鑒定相似的菌種,或對(duì)同種微生物分型。

          用已知菌種、型或菌株制成的抗血清,與待鑒定的對象是否發生特異性的血清學反應來鑒定未知菌種、型或菌株。該法常用於(yú)腸(cháng)道菌、噬菌體和病毒的分類鑒定。利用此法,已将傷寒杆菌、肺炎鏈球菌等菌分成數十種菌型。


      5、生活史

          生物的個體在一生的生長(zhǎng)繁殖過程中,經過不同的發育階段。這種過程對特定的生物來講是重複循環的,常稱(chēng)爲該種生物的生活周期或生活史。各種生物都有自己的生活史。在分類鑒定中,生活史有時也是一項指标,如黏細菌就是以它的生活史作爲分類鑒定的依據。


      6、對噬菌體的敏感性

          與血清學反應相似,各種噬菌體有其嚴格的宿主範(fàn)圍。利用這一特性,可以用某一已知的特異性噬菌體鑒(jiàn)定其相應的宿主,反之亦然。


      7、細胞壁組分分析

          細胞壁組分分析先應用於(yú)放線菌分類中,把它作爲區分“屬"的依據之一。近年來,有人對18個屬的放線菌的細胞壁進行瞭(le)分析,根據細胞壁的氨基酸組成,将其分爲6個細胞壁類型,又根據細胞壁的糖的組成分成4個糖類型,在此基礎上,結合形态特征提出瞭(le)相應的科屬檢索表。


      8、紅外光譜

          一般認爲,每種物質的化學結構都有特定的紅外光譜,若兩個樣品的吸收光譜wan全相同,可以初步認爲它們是同一種物質。因此,紅外光譜技術被應用到微生物的分類中。它先後對芽孢杆菌、乳酸菌、大腸(cháng)杆菌、酵母菌進行分類,近年來又應用於(yú)放線菌分類中。

          根據有關學者的試驗表明,這種方法簡便快速,樣品少,結果較好,不僅可以初步瞭(le)解各屬菌的細胞成分的化學性質,同時也有助於(yú)微生物間系統發育關系的探索。它也有不足之處,借助於(yú)紅外線光譜區分屬内的種和菌株是困難的,可以作爲“屬"的分類特征。