品牌: 恒遠生物
貨(huò)号: HYCC30031
中文名稱(chēng): 大鼠胚胎心肌細(xì)胞
規格: T25
形态特性: 上皮樣細(xì)胞生長(zhǎng)
生長特性: 貼壁生長
培養(yǎng)條(tiáo)件:DMEM+10%FBS
傳(chuán)代方法: 1:2~1:6傳(chuán)代；2~3天換(huàn)液1次。
凍(dòng)存條(tiáo)件: 無血清細胞凍(dòng)存液
特征特性：該細胞由Kimes B和Brandt B從(cóng)BD1X大鼠胚胎心髒組織的克隆細胞株亞克隆得到；表現出許多骨骼肌的特性。這個細胞株中的成肌細胞能融合形成多核的肌管，並(bìng)對乙酰膽堿的刺激發生反應 。如果培養基中的血清濃度下降到1%，融合很快發生。
一、細胞收到後處理
細胞在培養瓶中培養至良好狀态後灌滿培養液並(bìng)封好瓶口是細胞運輸的常見辦(bàn)法。收到細胞回到自己的實驗室後 ，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒後放到超淨台内，嚴格無菌操作 ，培養箱靜置2-4小時 。鏡下觀察：未超過80%彙合度時，可将瓶裝的培養液收集至離心管中，加入6ml培養基，放入37℃、孵箱培養；超過80%彙合度時，根據情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養步驟。（注意發貨的是密封培養瓶的話 ，處理完後放入培養箱培養記得培養瓶蓋子擰松，傳代後建議一瓶用原瓶裏面的培養基，另外一瓶用自己配的培養基），若是5%CO2的培養箱，可用密封培養瓶，擰緊瓶蓋後放入5%CO2培養箱 ，48H内要換液一次。
二、細胞培養步驟
1.培養皿/瓶用槍(qiāng)頭(tóu)或移液管吸去原培養液。
2.無菌PBS或無菌生理鹽水洗滌(dí)3次（按培養體積(jī)加入）。
3.加入适量胰酶消化适當(dāng)時間(jiān)（一般胰酶爲0.25%；9cm/10cm培養皿和25cm培養瓶，一次加入1mL胰酶。消化時間(jiān)視細胞類型等多種情況綜合考慮，一般如果是細胞株，非原代培養，消化1－2分鍾足矣）。
4.用槍(qiāng)頭吹打數十次（視細胞類(lèi)型而定。一般細胞株30－50次吧，耗時一般2分鍾左右）。
5. 加入适量體積(jī)培養基終止胰酶消化（如果是9cm/10cm培養皿和25cm培養瓶，可以加入1mL培養基；現在培養瓶（皿）裏(lǐ)有2mL溶液）。
6.現在可以将溶液進行分瓶（2mL）。如果是細胞株，直接均分到兩個(gè)培養瓶（皿）裏 。如果是原代培養 ，可以根據消化時間來對(duì)細胞進行分離；因此可以将溶液（2mL）都轉入新的培養瓶（皿）。
7.将兩個(gè)培養瓶（皿）補(bǔ)足培養基到正常體積（果是9cm/10cm培養皿和25cm培養瓶 ，爲5mL培養液）。
8.鏡下觀察。剛(gāng)剛(gāng)傳(chuán)代細胞還沒貼壁 ，懸浮在溶液中，呈圓形。一般2h之内會貼壁，如果已經貼壁，根據細胞類型有不同的形态，但通常都不是圓形。
9.鏡下觀(guān)察無誤之後(hòu)，再放入細胞培養箱。培養瓶（皿）放入之前 ，可以用消毒酒精先擦一下。
10.傳(chuán)代之後，最好第二天細胞換液一次。當(dāng)然，也可以視情況而定。
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