“OD值"這個概念想必做實驗的各位小夥伴們都不陌生，從判斷提取核酸的質量及濃度 ，到BCA蛋白定量進行蛋白定量，又或者是ELISA實驗檢測(cè)目的蛋白含量，這些常用的基礎實驗都需要檢測(cè)樣品的“OD值"，但是，“OD值"到底是什麽 ，我們在測(cè)量“OD值"的時候又有哪些需要注意的問題，今天就讓小編(biān)給小夥伴們好好說道說道 。什麽是“OD"值？
OD全稱optical density，也就是光密度，也可以稱爲吸光度。吸光度指的是利用物質的吸收光譜 ，來鑒别物質或者測(cè)定物質的含量 ，也就是将一束特定波長(zhǎng)的光通過被檢測(cè)物，被檢測(cè)物可以将光吸收掉一部分，通過吸光度計算被檢測(cè)物的濃度 。一般被檢測(cè)物濃度越高 ，吸光度的值就會越高。實驗中也是利用“OD值"和被檢測(cè)物的濃度之間的關系來根據吸光度。
測(cè)量“OD值"注意事項(xiàng) ：
最需要注意的就是測量時的光波長 。吸光度利用的是物質吸收光譜，實際操作中我們需要注意的最關鍵的也是這一點，不同物質的吸收光譜不同，最大吸收峰的波長也不同，爲瞭(le)達到好的測量效果，一般來講，我們需要在待測物質的最大吸收波長處來檢測其“OD值"。例如 ，核酸在260nm波長處光吸收最大，而蛋白和酚類物質則在280nm波長處光吸收最大；BCA法檢測蛋白含量時，顯色反應後 ，溶液由淺綠色變(biàn)爲紫色，此時在560nm處有最大光吸收值；TMB法顯色的ELISA實驗 ，在加入終止液後溶液由藍色變(biàn)爲黃色，在450nm處有最大光吸收。
對於(yú)測量得到的待測樣本“OD值"還需要進行換算才可以得到最終的濃度 ，有很多小夥伴往往在這一步出現錯誤，功虧一篑。需要注意的地方也比較簡單 ，就是根據對應試劑盒的說明書，採(cǎi)用推薦的曲線拟合方式進行拟合，拟合後需要看一下拟合曲線的R2值，約接近1證明曲線拟合度越高，結果越可信。如果R2值較低，則需要檢查是否出現标準品稀釋問題或實驗操作出現失誤。
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