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ELISA實驗樣本處理的注意事項

  • 發布日期:2024-06-04      浏覽次數:1049
    •     ELISA試劑盒檢測(cè)的樣本是有多種類型的,如血清、血漿、尿液 、細胞培養上清或安排勻漿液等,不同類型的檢測(cè)樣本前期的處理辦(bàn)法是不一樣的。試驗樣本的處理可謂是ELISA試驗的關鍵過程之一,所以科研朋友一定要多加注意。下面就給大家詳細說說!


          一、均質(zhì)   
          ①安排樣本:肉、肝食品類切細,用絞肉機(jī)重複(fù)絞碎,混合均勻。    
          ②水産(chǎn)樣本:去除樣品的非食用部分,食用部分切細 ,用均質器均漿;質料外表較髒時,需适當(dāng)用蒸餾水清洗 。
          ③蛋類:鮮蛋去殼(ké),蛋黃(huáng)和蛋白充沛混勻 。    
          ④水果、蔬菜類(lèi):先用水洗去泥沙,然後(hòu)除去外表的水分,取食用部分。

          二、振動(dòng)提取    
          将提取溶劑參(cān)加到裝有樣品的具塞容器中 ,振動,使提取溶劑與容器内的樣品充沛觸摸以深入到樣本安排内部,提取待測(cè)組分。
          ①振動(dòng)辦(bàn)法:振動(dòng)器上進行上下、往複式振動(dòng)、手搖式上下振動(dòng)。    
          ②在安排樣本中參加有機溶劑之間提取時 ,ELISA試劑盒應邊(biān)加邊(biān)振動 ,防止安排凝結成團,不利於(yú)提取。

          三、乳化現(xiàn)象
          在用有機溶劑提取過程中,假如呈現乳化現象,處(chù)理的辦(bàn)法有:    
          ①用細頭輕輕的拌和 ,損壞乳化後(hòu),再重複(fù)離心。    
          ②再參加适量的提取劑,重新振動。注意離心後要確(què)保樣本的稀釋倍數不變(biàn)。

          四、濃(nóng)縮(suō)
          因爲淨化過程中引進的溶劑,可能會降低待測(cè)組分的濃度或者不适宜直接剖析,需要去除全部有機溶劑。即試劑盒前處理過程中把樣本在60℃氮氣下吹幹,再用複溶液溶解枯燥殘(cán)留物。

          濃縮辦(bàn)法:氮氣吹幹(gàn)除雜、壓縮空氣吹幹(gàn)除雜。    
          請(qǐng)注意:
          ①在吹幹(gàn)樣本之前,用甲醇清洗針頭,防止雜質攪(jiǎo)擾。    
          ②在吹樣本時,針頭應在液面上空,防止與樣本觸(chù)摸,防止發(fā)生交叉污染。    
          ③樣本吹幹後應立即取下,防止吹的時刻過長(zhǎng),影響zui終檢測(cè)結果。    
          ④不同的藥物,吹幹(gàn)後樣本的保質期不同,ELISA試劑盒提倡待樣本回到室溫後立即複(fù)溶。

          五、淨(jìng)化
          經過提取的待測組分中一般含有一些會攪擾試劑盒中抗原抗體反響的雜質或者是含有與待測物結構相似的雜質。将待測組分與雜質别離的過程,咱們稱爲試劑盒中樣本的淨化。在咱們現有的試劑盒前處理辦(bàn)法中涉及到常見的淨化是:液液分配法。比方:用複溶液溶解枯燥殘留物之前先參(cān)加适量的正己烷,在參(cān)加正己烷和複溶液渦動後假如呈現乳化現象,能夠60℃水浴加熱,至乳化現象消失或削弱後,加大離心轉速進行離心。