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ELISA試劑盒靈敏度低?

  • 發布日期:2024-09-26      浏覽次數:1406
    • 近日,有客戶在做完實驗後,反映陽性對(duì)照、質控在内的所有闆孔顔色均較淡。這是什麽原因造成的?我司技術整理後給(gěi)出如下解析,邀您來看看!

       
      容易造成的原因有:
      1.試劑盒必須在有效期内使用, 超過(guò)有效期的産(chǎn)品可能會産(chǎn)生很弱的信号;
      2.試劑(jì)盒沒有按規(guī)定進行保存,受高溫影響;
      3.試(shì)劑(jì)、樣品用前未平衡至室溫;
      4.加入試劑(jì)的體積(jī)和時間有誤,移液器計量不準,吸嘴内水分太多或不清潔;
      5.洗闆及加樣過(guò)程中,酶标受污染失活而失去催化顯色劑(jì)顯色的能力;
      6.孵育時間及孵育溫度未達(dá)到要求 ,反應闆放入培養箱時注意溫度並(bìng)及時調整;
      7.洗闆次數過多,或濃縮洗液稀釋倍數不符合要求;洗滌沖(chōng)擊力太大。浸泡時間太長(zhǎng);
      8.顯色劑(jì)加量不足或順序颠倒,或混合後(hòu)加入;
      9.底物作用時間不夠;
      10.蒸餾(liú)水水質有問題(tí)。
       
      解決辦法:
      1.實驗前檢查試劑的組分及批号,確(què)認試劑未過(guò)期。
      2.不要将試劑盒長(zhǎng)時間置於(yú)常溫下,按使用規定儲藏。
      3.確(què)定所使用的試劑體積正確(què),加入時間适當(dāng)。
      4.校正移液器,移液器與吸嘴配合要緊密吻合。移液不宜太快,排放應幹(gàn)淨(jìng)。
      5.確(què)認盛酶标的容器不含酶抑制劑如疊氮鈉等,確(què)認配制洗液的容器已洗幹淨,確(què)認配制洗液的純(chún)化水達到要求且未受污染。
      6.孵育溫度應控制在 37-38℃,孵育時間(jiān)嚴格按照說明書操作。保溫期内不宜多開(kāi)門,以免影響保溫。
      7.嚴格按說明書要求稀釋濃縮洗液及洗闆 ,減小洗滌(dí)沖(chōng)擊力,按說明書要求置留洗滌(dí)液時間和洗滌(dí)次數。
      8.顯色劑滴瓶垂直向下,持力均勻,滴速不宜過(guò)快,先加顯色劑 A,後(hòu)加顯色劑B,不可将A、B液混合後(hòu)加入
      9.準確定時。
      10.測(cè)定蒸餾水配制試劑對(duì)酶免疫法的影響。
       

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