人胰島素試劑盒實驗原理

人胰島素試劑盒操作步驟：　　
1．從已平衡至室溫的密封袋中取出試驗所需闆條，未用的闆條和幹燥劑請放回鋁箔袋内壓 實自封條，密封口袋，放回4℃。　　
2．空白孔加标準品和标本稀釋液，其餘相應孔中加标本或不同濃度标準品（100ul/孔），用封闆膠紙封住反應孔，36℃孵箱孵育90分鍾。　　
3．提前20分鍾準備生物素化抗體工作液。　　
4．洗闆5次
。　　
5．空白孔加生物素化抗體稀釋液
，其餘孔加入生物素化抗體工作液（100ul/孔）。用新封闆膠紙封住反應孔，36℃孵箱孵育60分鍾。　　
6．提前20分鍾準備酶結合物工作液。避光室溫（22-25 ） ℃ 放置。　　
7．洗闆5次。　　
8．空白孔加酶結合物稀釋液，其餘孔加入酶結合物工作液（100ul/孔）。用新封闆膠紙封住反應孔，36℃孵箱，避光孵育30分鍾。　　
9．打開酶标儀電源，預熱儀器，設置好檢測程序。　　
10．洗闆5次。　　
11．加入顯色底物（TMB）100ul/孔，避光36℃孵箱，避光孵育15分鍾。　　
12．加入終止液100ul/孔, 混勻後即刻測量OD450值（3分鍾内）。在儀器保存讀數結果並打印一份紙質結果。　　
13．實驗完畢後将未用完的試劑按規定的保存溫度放回電冰箱保存至有效期結束。　　建議保存酶标闆框，以備下次或者今後試驗使用。　
人胰島素試劑盒檢測前準備工作：　　
1. 請提前20分鍾從冰箱中取出試劑盒，以平衡至室溫。　　
2. 将濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋（1:20）。未用完的放回4℃。　　
3. 标準品: 加入标準品/标本稀釋液0.5ml至凍幹标準品中，靜置15分鍾，待其充分溶解後，輕輕混勻（濃度爲1000 pg/ml）。然後根據需要進行稀釋。（建議标準曲線使用以下濃度： 1000、500、250、125、62.5、31.25、15.6、0 pg/ml）。複溶标準品原液（1000 pg/ml）若未用完請分裝後放入-20℃以下電冰箱内保存，保存兩個月。已稀釋的标準品請廢棄。　　
4. 生物素化抗體工作液：按當次試驗所需要得用量，使用前20分鍾，以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體（1:30）成工作濃度。當日使用。若實驗次數過多導緻生物素化 抗體量不足，可向我們公司單獨購買生物素化抗體。（須提供抗體批号）　　
5. 酶結合物工作液：按當次試驗所需要得用量，使用前20分鍾，以酶結合物稀釋液稀釋濃 縮酶結合物（1:30） 成工作濃度。當日使用。若實驗次數過多導緻濃縮酶結合物量不足， 可向我們公司單獨購買濃縮酶結合物。（須提供酶結合物批号）　　
洗滌方法：　　
1. 自動洗闆機：要求注入的洗滌液爲350ul，注入與吸出間隔15－30秒。洗闆5次。　　
2. 手工洗闆：甩盡孔内液體，在潔淨的吸水紙上拍幹，每孔加洗滌液350ul，靜置30秒後甩盡液體，在厚疊吸水紙上拍幹。洗闆5次。