ＲＤ“人可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體試劑盒 "質量保證 ，公司主要供應人、小鼠、大鼠、豚鼠 、兔子 、犬、雞(jī)、馬、猴、羊、豬、牛等各類植物動(dòng)物ELISA試劑盒,更多信息歡迎您。
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人可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體試劑盒規格 ：96人份/48人份
英文名稱：Human soluble tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,sTRAIL ELISA KIT
保存條件：2-8℃
檢測方法：酶聯免疫法/酶免法（ELISA）
經(jīng)營種類 ：進(jìn)口分裝和原裝
主要作用：科研
産品用途：For laboratory use only,Not for drug or other uses.本公司可提供免費代測服務.。
預期應用：ELISA法定量測定血清、血漿或其它相關生物液體中人可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體試劑盒含量。
實驗原理：
本試劑(jì)盒應用雙抗體夾心法測(cè)定标本中大鼠皮質酮（CORT）水平。用純(chún)化的大鼠皮質(zhì)酮（CORT）抗體(tǐ)包被微孔闆，制成固相抗體(tǐ)，往包被單(dān)抗的微孔中依次加入皮質酮（CORT），再與HRP标記(jì)的羊抗鼠抗體結(jié)合 ，形成抗體-抗原-酶标抗體複(fù)合物，經過*洗滌(dí)後加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色 ，並(bìng)在酸的作用下轉化成zui終的黃(huáng)色。顔色的深淺和樣品中的大鼠皮質酮（CORT）呈正相關。用酶标儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過(guò)标準曲線計(jì)算樣品中大鼠皮質酮（CORT）濃度。
試劑盒組成
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1 |
30倍濃縮洗滌液 |
20ml×1瓶 |
7 |
終止液 |
6ml×1瓶 |
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2 |
酶标試劑 |
6ml×1瓶 |
8 |
标準品（160pg/ml） |
0.5ml×1瓶 |
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3 |
酶标包被闆 |
12孔×8條 |
9 |
标準品稀釋液 |
1.5ml×1瓶 |
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4 |
樣品稀釋液 |
6ml×1瓶 |
10 |
說明書 |
1份 |
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5 |
顯色劑A液 |
6ml×1瓶 |
11 |
封闆膜 |
2張 |
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6 |
顯色劑B液 |
6ml×1/瓶 |
12 |
密封袋 |
1個 |
标本要求
1．标本採(cǎi)集後盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取後應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可将标本放於(yú)-20℃保存，但應避免反複凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
1. 标準品的稀釋 ：本試劑(jì)盒提供原倍标準品一支，用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
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80pg/ml |
5号标準品 |
150μl的原倍标準品加入150μl标準品稀釋液 |
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40pg/ml |
4号标準品 |
150μl的5号标準品加入150μl标準品稀釋液 |
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20pg/ml |
3号标準品 |
150μl的4号标準品加入150μl标準品稀釋液 |
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10pg/ml |
2号标準品 |
150μl的3号标準品加入150μl标準品稀釋液 |
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5pg/ml |
1号标準品 |
150μl的2号标準品加入150μl标準品稀釋液 |
2. 加樣 ：分别設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶标試劑，其餘各步操作相同）、标準孔、待測(cè)樣品孔。在酶标包被闆上标準品準確(què)加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋(shì)液40μl，然後再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度爲5倍）。加樣将樣品加於(yú)酶标闆孔底部，盡量不觸(chù)及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫(wēn)育 ：用封闆膜封闆後(hòu)置37℃溫育30分鍾。
4. 配液：将30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋後備用
5. 洗滌(dí) ：小心揭掉封闆膜，棄去液體，甩幹(gàn)，每孔加滿洗滌(dí)液，靜置30秒後棄去，如此重複5次，拍幹。
6. 加酶：每孔加入酶标試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育 ：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鍾.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍(lán)色立轉黃(huáng)色）。
11. 測定：以空白空調零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。
測定應在加終止液後15分鍾以内進行。
計算
以标準物的濃(nóng)度爲橫(héng)坐标，OD值爲縱坐标，在坐标紙上繪(huì)出标準曲線，根據(jù)樣品的OD值由标準曲線查出相應的濃(nóng)度；再乘以稀釋(shì)倍數；或用标準物的濃(nóng)度與OD值計(jì)算出标準曲線的直線回歸(guī)方程式，将樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即爲樣品的實際(jì)濃度。
注意事項
1．試劑盒從(cóng)冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鍾後(hòu)方可使用，酶标包被闆開(kāi)封後(hòu)如未用完，闆條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌(dí)液可能會(huì)有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌(dí)時不影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器，並(bìng)經常校對其準確(què)性，以避免試驗誤差 。一次加樣時間控制在5分鍾内，如标本數量多，推薦(jiàn)使用排槍(qiāng)加樣。
4．
請每次測(cè)定的同時做标準曲線，做複(fù)孔。如标本中待測(cè)物質含量過高（樣本OD值大於标準品孔*孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋(shì)液稀釋(shì)一定倍數（n倍）後(hòu)再測(cè)定，計算時請zui後(hòu)乘以總稀釋倍數（×n×5）。
5．
封闆(bǎn)膜隻(zhǐ)限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶标儀讀(dú)數爲準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳(chuán)染物處(chù)理。
9．本試(shì)劑(jì)不同批号組分不得混用。
10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)爲準。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6個月
公司秉承“專注品質、信守承諾、積極溝(gōu)通、創(chuàng)新服務”的企業文化積極參與生物領域的技術創新和技術服務，力求爲我國科研事業添磚加瓦。
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