人谷氨酸脫羧酶試劑盒實驗原理
發布日期:2013-04-19 浏覽次數:1626
人谷氨酸脫羧酶試劑盒實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測(cè)定标本中人谷氨酸脫羧酶(GAD)水平。用純化的人谷氨酸脫羧酶(GAD)抗體包被微孔闆,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入谷氨酸脫羧酶(GAD),再與HRP标記的谷氨酸脫羧酶(GAD)抗體結合,形成抗體-抗原-酶标抗體複合物,經過*洗滌後加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,並(bìng)在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顔色的深淺和樣品中的谷氨酸脫羧酶(GAD)呈正相關。用酶标儀在450nm波長下測(cè)定吸光度(OD值),通過标準曲線計算樣品中人谷氨酸脫羧酶(GAD)濃度。
人谷氨酸脫羧酶試劑盒注意事項:
1. 試劑盒從(cóng)冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鍾後(hòu)方可使用,酶标包被闆開(kāi)封後(hòu)如未用完,闆條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌(dí)液可能會(huì)有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌(dí)時不影響結果。
3. 各步加樣均應使用加樣器,並(bìng)經常校對其準確(què)性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鍾内,如标本數量多,推薦(jiàn)使用排槍(qiāng)加樣。
4. 請每次測(cè)定的同時做标準曲線,做複(fù)孔。如标本中待測(cè)物質含量過高(樣本OD值大於标準品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋(shì)液稀釋(shì)一定倍數(n倍)後(hòu)再測(cè)定,計算時請zui後(hòu)乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封闆(bǎn)膜隻(zhǐ)限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶标儀讀(dú)數爲準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳(chuán)染物處(chù)理。
9. 本試(shì)劑(jì)不同批号組分不得混用。
10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)爲準。