磷酸鹽緩沖液(Phosphate Buffered Saline,簡稱(chēng)PBS)的是常用於(yú)生物學研究的一個緩沖溶液。PBS可以爲三種溶液的英文縮寫,分别是磷酸鹽緩沖溶液(phosphate buffered solution)、磷酸鹽緩沖鹽水(phosphate buffered saline)及 磷酸鹽緩沖鈉(phosphate buffered sodium),其配制方法不同,pH值不同,發揮的生物學作用亦不*相同。
磷酸鹽緩沖液(PBS)配制方法:
稱取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶於800ml蒸餾水中,用HCl調節溶液的pH值至7.4,zui後加蒸餾水定容至1L即可。在15lbf/in2(1034×105Pa)高壓下蒸氣滅菌(至少20分鍾),保存存於室溫或4℃冰箱中。需要注意的是,通常所說的濃度0.01M 指的是緩沖溶液中所有的磷酸根濃度,而非Na 離子或K 離子的濃度,Na 離子和K 離子隻是用來調節滲透壓的。如果是用於免疫組化的話,則需要在配置的時候分别加入100 u/ml青黴素和鏈黴素之後再調PH、定容、滅菌消毒。
PH 7.6 7.4 7.2 7.0
H2O 1000 1000 1000 1000
NaCl 8.5 8.5 8.5 8.5
Na2HPO4 2.2 2.2 2.2 2.2
NaH2PO4 0.1 0.2 0.3 0.4
根據經驗來看,新鮮配置的PBS攪勻後其PH值約在7.2-7.4之間,可是在溫度的影響下,尤其在夏天,其電離常數發生瞭(le)改變(biàn),在經過晝夜的時間後,PH值會明顯改變(biàn)(我親自測過偏酸)。所以做實驗的同學可要注意瞭(le),PH值可能會影響實驗結果,甚至可能導緻陰性。所以務必記得這個時候和天氣,要加強實驗條件控制問題。每次使用前用試紙測一下過夜瞭(le)的PBS,如果發生偏酸或偏堿,注意重新換新液。