化學發光免疫分析法以标記方法的不同而分爲兩種:
(1)化學發光标記免疫分析法;
(2)酶标記、以化學發光底物作信号試劑的化學發光酶免疫分析法
化學發光标記免疫分析
化學發光标記免疫分析又稱化學發光免疫分析(CL IA ) , 是用化學發光劑直接标記抗原或抗體的免疫分析方法。常用於标記的化學發光物質有吖啶酯類化合物——acridin ium ester (A E) , 是有效的發光标記物[ 3 ] , 其通過起動發光試劑(N aOH2H2O 2 ) 作用而發光, 強烈的直接發光在一秒鍾内完成, 爲快速的閃爍發光。吖啶酯作爲标記物用於免疫分析, 其化學反應簡單、快速、無須催化劑; 檢測小分子抗原採用競争法, 大分子抗原則採用夾心法 , 非特異性結合少, 本底低; 與大分子的結合不會減小所産生的光量, 從而增加靈敏度。
化學發光酶免疫分析
從标記免疫分析角度, 化學發光酶免疫分析( chem ilum inescen t enzym e imm unoassay,CL E IA ) , 應屬酶免疫分析, 隻是酶反應的底物是發光劑, 操作步驟與酶免分析*相同[ 5 ]: 以酶标記生物活性物質(如酶标記的抗原或抗體) 進行免疫反應, 免疫反應複合物上的酶再作用於發光底物, 在信号試劑作用下發光, 用發光信号測定儀進行發光測定。目前常用的标記酶爲辣根過氧化物酶(HRP) 和堿性磷酸酶(AL P) , 它們有各自的發光底物。