大鼠白細胞介素1β[IL-1β]酶聯免疫分析試劑盒步驟分析

大鼠白細胞介素1β[IL-1β]酶聯免疫分析試劑盒實驗前處理步驟
1、試驗前将試劑和待測樣品放置室溫下平衡[20-25℃]充分混勻。並確定好本次檢測所需的酶标闆孔數目，将所需要的微孔放置到配套闆架上。
2、按照要求用蒸餾水或純淨水來稀釋濃縮清洗液，充分混勻後備用。
3、将本次實驗所需微孔做好相應标記，[如有需要做空白對照孔可預留一孔作爲空白對照孔備用]，採用雙孔平行加樣。
大鼠白細胞介素1β[IL-1β]酶聯免疫分析試劑盒加樣以及溫育步驟
1、在微孔中将标準品按每孔各[100μl]依次加入一排孔中
，並做好相應标記。

2、将處理後的待測樣品按每孔各[100μl]依次加入，並做好相應标記。注标準品及樣品不要重複加入同一微孔中。
3、如預留瞭空白對照孔則除去空白對照孔之外在标準品孔及待測樣品孔中分别加入[50μl]酶标記物，充分混勻。
[重要說明]：加樣時盡量将液體加到微孔底部不要觸及孔壁，産生大量的氣泡。這樣會導緻吸光度值的偏差。使用雙孔試驗将會大大減少這一現象的發生。建議每次檢測均應繪制标準曲線圖。
4、将包被微孔闆覆膜或加蓋放置在37℃孵育反應60分鍾後充分棄盡孔内液體並扣幹孔内剩餘殘液，用預先稀釋好的清洗液反複沖洗5次[zui後一次沖洗後可使用幹淨的吸水紙包裹微孔闆倒置於桌面拍打以充分棄盡孔内剩餘殘液。每次沖洗的間隔時間爲3-5秒即可]。
[重要說明]：洗滌過程非常重要，在沖洗微孔闆過程中，務必反複清洗幹淨，並扣幹微孔中的殘餘液體，不要使孔内液體溢出污染其他實驗孔，否則将導緻降低度，造成吸光度偏高的假象並有可能使實驗zui終失敗。
5、如預留瞭空白對照孔則應包括空白對照孔在内，每孔依照次序先加入底物Ⅰ一滴[約50μl]。再加入底物Ⅱ一滴[約50μl]充分混勻。在室溫下避光反應15分鍾。6
反應過後每孔分别加入終止液[50μl]，充分混勻，終止反應。
[重要說明]：加底物Ⅰ/Ⅱ及終止液的過程一定要按照先後順序進行，不得颠倒，也不可先将2種底物混合後再加入微孔中，否則将會導緻試驗失敗。