由於瑞氏染液的實用性,所以瑞士染色法在臨床上zui常使用,下面就由上海勁馬朱爲大家分享一下關於他在瑞士染色法的研究心得。
瑞氏染液是由酸性染料伊紅和堿性染料美藍組成的複合染料,溶於甲醇,伊紅通常爲鈉鹽,有色部分爲陰離子。亞甲藍(又名美藍)爲四甲基硫堇染料,有對醌型和鄰醌型兩種結構。通常爲氯鹽,即氯化美藍,有色部分爲陽離子。美藍容易氧化爲一、二、*基硫堇等次級染料(即天青)。将适量伊紅、美藍溶解在甲醇中,即爲瑞氏染料。
瑞氏染液染色原理:
既有物理的吸附作用,又有化學的親和作用。各種細胞成分化學性質不同,對各種染料的親和力也不一樣。如血紅蛋白、嗜酸性顆粒爲堿性蛋白質,與酸性染料伊紅結合,染粉紅色,稱爲嗜酸性物質;細胞核蛋白、淋巴細胞、嗜堿性粒細胞胞質爲酸性,與堿性染料美藍或天青結合,染紫藍色或藍色,稱爲嗜堿性物質;中性顆粒呈等電狀态與伊紅和美藍均可結合,染淡紫紅色,稱爲嗜中性物質、原始紅細胞、早幼紅細胞胞質、核仁含較多酸性物質,染成較濃厚的藍色;中幼紅細胞既含酸性物質,又含堿性物質,染成紅藍色或灰紅色;*成熟紅細胞,酸性物質*消失後,染成粉紅色。
瑞氏染液染色方法和注意事項:
(1)血塗片幹透後固定,否則細胞在染色過程中容易脫落。
(2)沖洗時應以流水沖洗,不能先倒掉染液,以醫.學教.育網整.防染料沉著在血塗片上。沖洗時間不能過久,以防脫色。如血塗片上有染料顆粒沉積,可滴加甲醇,然後立即用流水沖洗。
(3)染色過淡可以複染,複染時應先加緩沖液,然後加染液。染色過深可用流水沖洗或浸泡,也可用甲醇脫色。
(4)瑞氏染色Ⅰ液由瑞氏染料、甲醇(AR級以上)和甘油組成,Ⅱ液爲磷酸鹽緩沖液(pH6.4~pH6.8)。
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