幹擾素蛋白表達問題解答
請教各位幾個問題:我用pGEX-6p-1做的幹擾素蛋白表達
問題1:採用一系列不同尿素濃度的複性緩沖液進行複性,這一系列複性緩沖液可以重複利用嗎?如果還有其他蛋白可以同時使用進行複性嗎?
答案1.現用現配,因爲使用後的系列緩沖液各種成分(尿素,氧化型還原型谷胱甘肽等)濃度改變(biàn),你根本不好確(què)定下次複性時的準確(què)條件,重複性不好把握;
問題2:複性後,不經過過柱純化直接進行抗病毒活性檢測可以嗎?
答案2.不經過柱純化,直接用融合蛋白進行抗病毒活性檢測(cè)麽?那标簽GST怎麽辦(bàn),應該上柱後酶切再收集目的蛋白檢測(cè)吧;
問題3:檢測有活性後可以直接用來免疫動物嗎?(同樣是未經過柱純化)
答案3.結論同上。
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