上海恒遠生物友情提醒雜交瘤細胞的保存與複蘇問題解答，歡迎參(cān)考内容，或者我司訂購試劑産(chǎn)品 。謝謝您的光臨.上海恒遠生物祝您購物愉快！
我們(men)根據(jù)實驗分析雜交瘤的保存
當獲得産生所需的單克隆抗體的雜交瘤細胞後，必須将一部分雜交瘤細胞保存，否則在連續傳代的過程中，可能産生突變(biàn)或染色體的漂移以至喪失固有特性或丢失産生抗體的特性 。另外在長期的培養過程中，難免不發生污染以至於(yú)毀滅。所以必須冷藏保存一部分 。保存方法如下：
1．材料
(1) 細胞：取對(duì)數生長(zhǎng)期的細胞。
(2) 10％二甲基亞砜保護(hù)液（二甲基亞砜能損壞濾器，而又被高壓所破壞，所以不能過(guò)濾或高壓消毒。其本身就是品，無菌）：含10％二甲基亞砜、20％滅活胎牛血清 ，70％RPMI—1640液 。
(3) 20％FCS—1640培養液：含青黴(méi)素100U/ml，鏈(liàn)黴(méi)素100μg/ml。
(4) 滅(miè)菌的2ml安瓶等
2．操作方法
(1) 去掉細(xì)胞培養瓶中的舊(jiù)的培養液，加入10％FCS—1640液 ，使細(xì)胞懸浮 。
(2) 1 000r/min離心10min，去上清。細胞沉澱(diàn)用10％二甲基亞砜保護(hù)液制成懸液 ，使成1.0×107細胞／ml。
(3) 取樣，台盼蘭(lán)染色，計(jì)數活細胞，應在95％以上。
(4) 用注射器将細(xì)胞分裝(zhuāng)安瓶，每瓶0.5ml～1.0ml，熔封安瓶。
(5) 放4℃ 2h。
(6) 放液氮罐氣(qì)态部分（-70℃）15h。
(7) 轉(zhuǎn)入液氮部分。
（二）複(fù)蘇(sū)
1．從(cóng)液氮罐中取出安瓶立即放37℃水浴中速溶 。
2．無(wú)菌操作打開(kāi)安瓶，取出細胞懸液，轉入組織培養瓶。
3．逐滴緩慢加入20％FCS－1640培養液3.5ml，這個(gè)過(guò)程延續3min。
4．5％CO2飽(bǎo)和濕(shī)度，37℃培養。
5．4h後(hòu)棄(qì)去培養液上清，加入新鮮的20％FCS－1640培養液。
6．繼續培養 ，換液，以至形成單(dān)層(céng) 。
看完以上建議，您應該對雜交瘤有所瞭(le)解瞭(le)吧，我司從事試劑盒，試劑研究多年，有著(zhe)豐富的科研經驗，爲您在生物領域開辟新的實驗成功。上海恒遠生物，您身邊的科研專家！
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