Elisa試劑盒保溫很重要

Elisa試劑盒保溫很重要
　　上海恒遠生物在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應，即加标本和加酶結合物後。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間，這一保溫過程稱(chēng)爲溫育(incubation)，有人稱(chēng)之爲孵育，在ELISA中似不恰當(dāng)。
　　ELISA屬固相免疫測(cè)定，抗原、抗體的結合隻在固相表面上發生。以抗體包被的夾心法爲例，加入闆孔中的标本，其中的抗原並(bìng)不是都有均等的和固相抗結合的機會，隻有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程
，因此需經擴散才能達到反應的終點。在其後加入的酶标記抗體與固相抗原的結合也同樣如此。這就是爲什麽ELISA反應總是需要一定時間的溫育。
　　溫育常採(cǎi)用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃（冰箱溫度）等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度，也是大多數抗原抗體結合的合适溫度。在建立ELISA方法作反應動力學研究時，實驗表明，兩次抗原抗體反應一般在37℃經1-2小時，産物的生成可達。爲加速反應，可提高反應的溫度，有些試驗在43℃進行，但不宜採(cǎi)用更高的溫度。抗原抗體反應4℃更爲*，在放射免疫測(cè)定中多使反應在冰箱中過一夜，以形成zui多的沉澱。但因所需時間太長，在ELISA中一般不予採(cǎi)用。
　　保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外，一般均採用水浴，可将ELISA闆置於(yú)水浴箱中，ELISA闆底應貼著(zhe)水面，使溫度迅速平衡。爲避免蒸發，闆上應加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋闆孔，此時可讓反應闆漂浮在水面上。若用保溫箱，ELISA闆應放在濕盒内，濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等，在盒底墊濕的紗布，zui後将ELISA闆放在濕紗布上。濕盒應先放在保溫箱中預溫至規定的溫度，特别是在氣溫較低的時候更應如此。無論是水浴還是濕盒溫育，反應闆均不宜疊放，以保證各闆的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應，操作時的室溫應嚴格限制在規定的範圍内，标準室溫溫度是指20-25℃，但具體操作時可根據說明書的要求控制溫育。室溫溫育時，ELISA闆隻要平置於(yú)操作台上即可。應注意溫育的溫度和時間應按規定力求準確。爲保證這一點，一個人操作時，一次不宜多於(yú)兩塊闆同時測定。