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7月盛夏“熱”點聚交之大鼠内皮素1ELISA試劑盒

  • 發布日期:2014-07-11      浏覽次數:1505
    •       ELISA試劑(jì)盒是我們公司主營産(chǎn)品,種屬标本齊全, 有人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒 ,豬ELISA試劑盒,猴子ELISA試劑盒,兔ELISA試劑盒 ,雞ELISA試劑盒 ,魚ELISA試劑盒等等。有專門針對(duì)人血清 、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養上清液、組織勻漿、組織液等标本的試劑(jì)盒;我們的試劑盒是美國RD進口分裝的,(國産(chǎn)跟*的都有)價格實惠且質量保證,售前,售中,售後提供技術指導,購買我們的試劑盒還可享受免費代測(cè)的服務。

      大鼠内皮素1試劑盒說明書

      本試劑(jì)盒僅(jǐn)供研究使用 。

      檢測範圍:                                                          

      8μg/L -200μg/L

       

      使用目的:

      本試劑盒用於測定大鼠血清、血漿(jiāng)及相關(guān)液體樣本中内皮素1(ET-1)含量

      實驗原理

      本試劑(jì)盒應用雙抗體夾心法測(cè)定标本中大鼠内皮素1(ET-1)水平。用純化的大鼠内皮素1(ET-1)抗體包被微孔闆,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入内皮素1(ET-1)再與HRP标記的内皮素1(ET-1)抗體結合,形成抗體-抗原-酶标抗體複(fù)合物 ,經過*洗滌(dí)後加底物TMB顯色 。TMBHRP酶的催化下轉化成藍色,並在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顔色的深淺和樣品中的内皮素1(ET-1)呈正相關。用酶标儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過(guò)标準曲線計(jì)算樣品中大鼠内皮素1(ET-1)濃度。

      标本要求

      1.标本採(cǎi)集後盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取後應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可将标本放於-20保存,但應避免反複(fù)凍(dòng)融

      2.不能檢(jiǎn)測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

      操作步驟

      1. 标準品的稀釋:本試劑(jì)盒提供原倍标準品一支 ,用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進行稀釋 。

      200μg/L

      5号标準品

      150μl的原倍标準品加入150μl标準品稀釋液

      100μg/L

      4号标準品

      150μl5号标準品加入150μl标準品稀釋液

      50μg/L l

      3号标準品

      150μl4号标準品加入150μl标準品稀釋液

      25μg/L

      2号标準品

      150μl3号标準品加入150μl标準品稀釋液

      12.5μg/L

      1号标準品

      150μl2号标準品加入150μl标準品稀釋液

       

       

      1. 加樣:分别設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶标試劑,其餘各步操作相同)、标準孔、待測(cè)樣品孔。在酶标包被闆上标準品準確(què)加樣50μl待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋(shì)液40μl,然後再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度爲5倍)。加樣将樣品加於(yú)酶标闆孔底部,盡量不觸(chù)及孔壁,輕輕晃動混勻。
      2. 溫育:用封闆膜封闆後置37溫育30分鍾。  
      3. 配液 :将20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋後備用
      4. 洗滌(dí):小心揭掉封闆膜,棄去液體,甩幹(gàn) ,每孔加滿洗滌(dí)液,靜置30秒後棄去,如此重複5次,拍幹。
      5. 加酶:每孔加入酶标試劑50μl,空白孔除外 。
      6. 溫育:操作同3
      7. 洗滌:操作同5
      8. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鍾.
      9. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍(lán)色立轉黃(huáng)色)。

      測定:以空白空調零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液後15分鍾以内進行。

      注意事項

      1.試劑盒從(cóng)冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鍾後(hòu)方可使用,酶标包被闆開(kāi)封後(hòu)如未用完,闆條應裝入密封袋中保存。

      2.濃洗滌(dí)液可能會(huì)有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌(dí)時不影響結果。

      3.各步加樣均應使用加樣器,並(bìng)經常校對其準確(què)性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鍾内,如标本數量多,推薦(jiàn)使用排槍(qiāng)加樣 。

      1. 請每次測(cè)定的同時做标準曲線,做複(fù)孔。如标本中待測(cè)物質含量過高(樣本OD值大於标準品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋(shì)液稀釋(shì)一定倍數(n倍)後(hòu)再測(cè)定,計算時請zui後(hòu)乘以總稀釋倍數(×n×5)。
      2. 封闆(bǎn)膜隻(zhǐ)限一次性使用,以避免交叉污染。

      6.底物請避光保存。

      7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶标儀讀(dú)數爲準.

      8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳(chuán)染物處(chù)理。

      9.本試(shì)劑(jì)不同批号組分不得混用。

      10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)爲準。

      保存條件及有效期

      1.試劑盒保存:2-8℃。

      2.有效期:6個月

            上海恒遠生物科技有限公司生産(chǎn)經營生物化學産(chǎn)品,主打産(chǎn)品包括酶聯免疫(elisa)試劑盒,重組蛋白,純化抗體,sigma化學試劑。經過多年的市場(chǎng)經營,我們的産(chǎn)品已經推廣到各大科研單位及高等院校,深受客戶的信賴。歡迎新老客戶或進入公司訂貨,同時感謝廣大客戶對我司一如既往的支持與信任。