Elisa法中血清标本的處理保存意見

Elisa法中血清标本的處理保存意見


酶聯免疫吸附實驗(ELISA) 即将已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面，使酶标記的抗原抗體反應在固相表面進行的技術。該技術可用於(yú)檢測(cè)大分子抗原和特異性抗體等，具有快速、靈敏、簡便、載體易於(yú)标準化等優點。酶聯免疫吸附實驗中血清的具體處理保存意見，請跟随小編(biān)一起瞭(le)解下：


?(1)要注意避免出現嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團，其有類似過氧化物的活性，因此，在以HRP爲标記酶的ELISA測定中，如血清标本中血紅蛋白濃度較高，則其就很容易在溫育過程中吸附於固相，從而與後面加入的HRP底物反應顯色。
(2)樣本的採集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染，一則細菌的生長，其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白産生分解作用;二則一些細菌的内源性酶如大腸杆菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應酶作标記的測定方法産生非特異性幹擾。
(3)血清标本如是以無菌操作分離，則可以在2～8℃下保存一周，如爲有菌操作，則建議冰凍保存。樣本的長時間保存，應在-70℃以下。
(4)冰凍保存的血清标本須注意避免因停電等造成的反複凍融。标本的反複凍融所産生的機械剪切力将對标本中的蛋白等分子産生破壞作用，從而引起假陰性結果。此外，凍融标本的混勻亦應注意，不要進行劇烈振蕩，反複颠倒混勻即可
。
(5)标本在保存中如出現細菌污染所緻的混濁或絮狀物時
，應離心沉澱後取上清檢測。

Elisa技術可以充分利用單克隆抗體的優點，並能利用某些非免疫反應試劑（如SPA、凝集素等）的作用，發展成爲許多新方法。此外，發展Elisa技術還可以從酶及其底物兩方面著手
。這是因爲：*，用於Elisa技術的酶其種類遠遠多於可用作RIA檢測指示劑的放射性同位素。生物界的酶多種多樣，有希望開發很多類型的酶用於Elisa，並建立相應的Elisa方法。相反，自然界的化學元素是有限的，放射性同位素的種類更加有限。第二，由於酶的多樣性，酶作用底物也有多種多樣，與此相對應的生色源或供氫體的種類也有遠大的開發和發展潛力。