通常我們可用於ELISA檢測(cè)的樣本是有多種類型的，如血清、血漿、尿液、細胞培養上清或組織勻漿液等 ，不同類型的檢測(cè)樣本前期的處理方法是不一樣的。正確(què)的處理樣本是保證ELISA檢測的正確(què)性和準確(què)性的*步，下面簡單介紹一下細胞裂解液樣本及組織勻漿樣本的正確(què)採(cǎi)集、處理方法。
細胞裂解液
1) 吸去培養闆内的培養基 ，用胰酶消化細胞 ，加适量培養基将細胞從(cóng)培養闆上吹下來(lái) 。懸浮細胞可省略。
2) 收集細胞懸液，1000×g離心10min，棄(qì)去培養(yǎng)基，用預冷的PBS潤洗3次。
3) 加入适量的預冷PBS或細胞裂解液（臨(lín)用前加入蛋白酶抑制劑(jì)）重懸細胞。通常6孔闆一個孔的細胞量需要150~250μL PBS重懸。
4) 将樣品放入-20℃或-80℃，使樣品冷凍(dòng) ，再放室溫解凍(dòng)樣品，反複凍(dòng)融幾次，使細胞充分裂解。也可将樣品進行超聲破碎 ，以達(dá)到裂解的目的。
5) 4℃10000×g 離心10min，除去細(xì)胞碎片 ，取上清，-20℃或-80℃保存 ，避免反複(fù)凍(dòng)融 。
組織勻漿液
1) 将組織樣本用PBS (0.01M, PH 7.4) 沖(chōng)洗，洗去組織表面殘(cán)留的血液或雜質。
2) 将組織塊稱(chēng)重，記錄後剪碎，碎塊應盡量小，便於(yú)勻漿得更充分。
3) 将組織(zhī)按一定的比例加入預(yù)冷的PBS（臨用前加入蛋白酶抑制劑(jì)）勻漿，勻漿時置於(yú)冰上或冰浴中。（通常按組織重量 ：PBS體積=1:9的比例勻漿，例如1g的組織樣本對應9mL的PBS，具體體積可根據實驗需要适當(dāng)調整，檢測(cè)後計算樣品濃度時應乘以相應的稀釋倍數）。
4) 吸取勻漿液到離心管，4℃5000×g 離心5~10min，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反複凍融。
注意：保證樣本不含NaN3，因爲NaN3會抑制HRP的活性，從(cóng)而導(dǎo)緻假陰性的結果。
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