ELISA試劑盒常見問題解析

                                                       ELISA試劑盒問題解析
    設計ELISA複孔檢查時，是對同一個樣品作兩次稀釋，再分别加到闆上的兩個孔，還是隻稀釋一次，然後吸取兩次分别加到兩個孔？前者似乎把稀釋時的誤差也考慮到瞭，但做出來的結果兩個孔相關挺大的。而較常使用的是哪種稀釋方法？
    爲瞭減小誤差，是先稀釋再加樣。而針對這位客戶所遇到的疑問，我公司技術人員是這樣解說的：
    1. 前者測的是稀釋和移液的誤差，後者隻有移液誤差
。
    2. 一般都是稀釋一次，分兩孔吧。同濃度的分複孔。
    3. 由於是從同一原液稀釋，一般不考慮稀釋誤差(稀釋誤差是存在的)，都是稀釋到想要的倍數直接分孔(而不是一一稀釋，這樣可以使稀釋誤差減小)。
    4. 複孔是爲瞭排除移液體積，闆的影響，以及其他系統誤差的，要求複孔的濃度是一緻的。稀釋後分孔能滿足此要求，一一稀釋不能。

ELISA操作技巧
    1.操作前應對實驗的物理參數有充分的瞭解，如環境溫度（保持在18 C～25℃）、反應孵育溫度和孵育時間、洗滌的次數等，要先查看水育箱溫度，ELISA試劑盒是否符合要求。
    2.正確使用加樣器加樣器應垂直加入标本或試劑，避免刮擦包被闆底部。加樣過程中避免液體外濺，血清殘留在反應孔壁上，加樣器吸頭要清洗幹淨，避免污染，加樣次序要與說明書一緻，否則可導緻結果錯誤，實驗重複性差。
    3.手工洗闆加洗液時沖擊力不要太大，洗滌次數不要超過說明書推薦的洗滌次數，洗液在反應孑L内滞留的時間不宜太長。不要使洗液在孑L間竄流，造成孔問污染，導緻假陰性或假陽性。
    4.要保證加液量一緻 我們在使用時感覺滴瓶加液不如加樣器好，滴瓶不易控制加液量不準，造成顯色不統一，判斷錯誤。
    5.顯色液量不可過多 加樣的工作環境不能處於陽光直射的環境下，加顯色系統後要避光反應，顯色液量不能過多，以免顯色過強。