十年沉澱，參考信息日益完善，操作流程方便易學，在科研界奠定瞭(le)堅實的實驗基礎。科研人員不斷潛心研發 ，讓參考數值越來越 ，減少實驗誤差。現貨供應 ，。滿足行業的不同需求，針對不同客戶的實驗要求制定不同的使用方案。随著(zhe)國内生物科研領域的發展，在未來的幾年ELISA試劑盒的需求會更多。
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檢測(cè)範(fàn)圍： 96T
1μmol/L - 32μmol/L
使用目的：
本試劑用於(yú)測(cè)定人血清、血漿及相關液體樣本中一氧化氮合成酶 （NOS）含量。實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測(cè)定标本中人一氧化氮合成酶 （NOS）水平 。用純化的人一氧化氮合成酶（NOS）抗體包被微孔闆，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入一氧化氮合成酶（NOS），再與 HRP标記的一氧化氮合成酶 （NOS）抗體結合，形成抗體 -抗原-酶标抗體複合物 ，經過*洗滌後加底物 TMB顯色 。TMB在 HRP酶的催化下轉化成藍色 ，並(bìng)在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顔色的深淺和樣品中的一氧化氮合成酶（NOS）呈正相關 。用酶标儀在450nm波長下測(cè)定吸光度（OD值），通過标準曲線計算樣品中人一氧化氮合成酶（NOS）濃度。
試劑盒組成
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标本要求
1．标本採(cǎi)集後盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取後應盡快進行實驗 。若不能馬上進行試驗，可将标本放於(yú) -20℃保存 ，但應避免反複凍融
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品 ，因 NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（ HRP）活性。操作步驟
1.标準品的稀釋：本試劑(jì)盒提供原倍标準品一支，用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2.加樣 ：分别設空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶标試劑(jì)，其餘各步操作相同）、标準孔 、
待測樣品孔。在酶标包被闆上标準品準確(què)加樣 50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl，然後再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度爲 5倍）。加樣将樣品加於(yú)酶标闆孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.溫(wēn)育：用封闆膜封闆後(hòu)置 37℃溫(wēn)育 3 0分鍾 。
4.配液 ：将 30倍濃縮洗滌(dí)液用蒸餾水 30倍稀釋後備(bèi)用
5.洗滌(dí)：小心揭掉封闆膜，棄去液體，甩幹，每孔加滿洗滌(dí)液，靜置 30秒後棄去，如此重複(fù) 5次，拍幹。
6.加酶：每孔加入酶标試(shì)劑(jì) 50μl，空白孔除外 。
7.溫(wēn)育：操作同 3。
8.洗滌(dí)：操作同 5。
9.顯色 ：每孔先加入顯色劑(jì) A50μl，再加入顯色劑(jì) B50μl，輕輕震蕩(dàng)混勻， 37℃避光顯色15分鍾.
10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應（此時藍(lán)色立轉黃(huáng)色）。
11.測(cè)定 ：以空白空調零， 450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（ OD值）。測(cè)定應在加終止
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液後 15分鍾以内進(jìn)行 。操作程序總結(jié)：
計算
以标準物的濃度爲橫(héng)坐标， OD值爲縱坐标，在坐标紙上繪出标準曲線，根據樣品的 OD值由标準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用标準物的濃度與 OD值計算出标準曲線的直線回歸(guī)方程式，将樣品的 OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即爲樣品的實際濃度。
注意事項
1．試劑盒從(cóng)冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30分鍾後(hòu)方可使用，酶标包被闆開封後(hòu)如未用完 ，闆條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌(dí)液可能會(huì)有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶 ，洗滌(dí)時不影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器，並(bìng)經常校對其準確(què)性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5分鍾内，如标本數量多，推薦使用排槍加樣。
4．請每次測(cè)定的同時做标準曲線 ，做複孔。如标本中待測(cè)物質含量過高（樣本 OD值大於(yú)标準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（ n倍）後再測(cè)定，計算時請zui後乘以總稀釋倍數（×n×5）。
5．封闆(bǎn)膜隻(zhǐ)限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶标儀讀(dú)數爲準 .
8．所有樣品 ，洗滌液和各種廢棄物都應按傳(chuán)染物處(chù)理。
9．本試(shì)劑(jì)不同批号組分不得混用。 10. 如與英文說明書有異，以英文說明書爲準 。保存條件及有效期
1．試(shì)劑(jì)盒保存：；2-8℃。
2．有效期： 6個(gè)月
标本收集方法：
1. 血清：
室溫血液自然凝固10-20分鍾後，離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成，應再次離心。
2. 血漿：
應根據标本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作爲抗凝劑，混合10-20分鍾後，離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成，應再次離心。
3. 尿液：
用無菌管收集。離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成，應再次離心 。胸腹水 、腦脊液參照此實行。
4. 細胞培養上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。
5. 培養細胞
檢測細胞内的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反複凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞並放出細胞内成份。離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成，應再次離心。
6. 組織标本
切割标本後，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。标本融化後仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器将标本勻漿化。離心20分鍾左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝後一份待檢測，其餘冷凍備用。
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