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伏馬毒素ELISA試劑盒說明書

  • 發布日期:2013/7/12      浏覽次數:1374
  • 提 供 商: 上海恒遠生物科技有限公司 資料大小: PNG
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    本試劑盒僅供研究使用。

    伏馬毒素ELISA試劑盒使用目的 :

    本試劑盒用於(yú)飼料、魚、蝦和肉類組織(如雞(jī)、牛肉和豬肉),雞(jī)蛋、蜂蜜、牛奶、血

    清和尿樣中伏馬毒素(FB1)殘留的定量檢測。

    伏馬毒素ELISA試劑盒實驗原理

    本試劑盒採用競争ELISA 方法,在微孔闆(bǎn)包被有伏馬(mǎ)毒素(FB1)偶聯抗原,加入伏

    馬毒素(FB1)标準品或樣品,遊離(lí)伏馬(mǎ)毒素(FB1)與微孔條(tiáo)上預包被的伏馬(mǎ)毒素(FB1

    偶聯(lián)抗原互相競(jìng)争抗伏馬毒素(FB1)抗體酶标記物,用TMB 底物顯(xiǎn)色,加入終止液後(hòu)顔

    色由藍色變(biàn)爲黃(huáng)色,用酶标儀在450nm 波長(zhǎng)下進行檢測(cè),吸光值與樣品中伏馬毒素(FB1

    含量成反比,通過(guò)标準曲線計(jì)算樣品中伏馬毒素(FB1)的含量。

    伏馬毒素ELISA試劑盒組成

    預包被的伏馬毒素(FB1)偶聯(lián)抗原的可拆酶标闆(bǎn):1 塊(12 孔×8 條)。

    伏馬毒素(FB1)标準品:6 瓶(1ml/瓶),含量分别是: 0 ppb0.1 ppb,0.3 ppb,0.9 ppb,2.7

    ppb,8.1 ppb

    抗伏馬毒素(FB1)抗體酶結合物:1 瓶(6ml)。

    顯色液A1 瓶(6ml)。

    顯色液B1 瓶(6ml)。

    終止液:1 瓶(6ml),2M 硫酸。

    樣本稀釋液 :1 瓶(10×, 6ml),用於樣品稀釋用。

    濃縮洗滌液:1 瓶(20×,20ml),用於洗闆 。

    說明書一份。

    伏馬毒素ELISA試劑盒貯存 :

    1.試劑盒貯存於2~8℃,切勿冷凍

    2.未用完的微孔闆應該(gāi)密封幹(gàn)燥保存

    伏馬毒素ELISA試劑盒注意事項

    1.使用試劑(jì)盒前請仔細閱讀(dú)說明書。

    2.不要使用過期試劑盒。

    3.試劑(jì)盒使用前,将試劑(jì)恢複(fù)至室溫(25±2℃),建議至少回溫2小時。

    4.标準品中含有伏馬毒素(FB1),使用時(shí)應特别注意,操作時(shí)應帶(dài)手套。

    5.終止液中含有硫酸,使用時防止灼傷(shāng)皮膚(fū)及腐蝕衣物。

    6.不同标準品、樣品所用吸頭不能混用,否則會(huì)影響試驗結(jié)果 。

    7.不同批号試劑(jì)盒中的試劑(jì)不得混用;不同标準品、樣品所用吸頭不得混用,否則會(huì)影響

    實驗結果。

    8.稀釋樣本時必須用本試劑(jì)盒中的樣本稀釋液,否則會(huì)影響實驗結果

    9.混合試劑(jì)時(shí)應避免起泡。

    伏馬毒素ELISA試劑盒工作液準備

    伏馬毒素(FB1)标準品溶液:0ppb,0.1ppb,0.3 ppb,0.9ppb,2.7 ppb,8.1ppb

    濃縮洗滌(dí)液:用蒸餾(liú)水按1:20(1+19)稀釋備用

    樣本稀釋液:備用

    顯色劑(jì):已備(bèi)用,避免光線直照

    反應終止液:已備用

    伏馬毒素ELISA試劑盒樣品處理:

    10g粉碎的樣品,加 20ml 70%甲醇溶液

    強力振蕩3分鍾

    Whatman 濾紙過濾

    25μl處理後的樣品,加入25μl樣本稀釋(shì)液於(yú)反應孔中(樣本稀釋(shì)倍數爲2

    伏馬毒素ELISA試劑盒結果計算

    定量分析:

    所獲(huò)得的每個(gè)濃度标準溶液和樣本吸光度值的平均值(B)除以*個标準(0标準)

    的吸光度值(B0)再乘以100%,即百分吸光度值。

    B 标準(zhǔn)溶液或樣(yàng)本溶液的平均吸光度值

    B0 0μg/L标準溶液的平均吸光度值

    以伏馬毒素(FB1)濃度的對數值爲X軸,百分吸光度值爲Y軸,繪(huì)制标準曲線圖(tú)。根

    據樣品百分吸光度值,可從(cóng)曲線上得到對應點(diǎn)的橫坐标,即爲伏馬毒素(FB1)濃度的對數

    值,求得反對(duì)數即爲測(cè)定液中伏馬毒素(FB1)濃度Cppb

    由於(yú)樣品經過瞭(le)預先稀釋,因此根據标準曲線所得出的樣品濃度一定要再乘以其稀釋

    倍數。

    半定量測定:

    目測(cè)半定量測(cè)定:首先選擇一個适當(dāng)的标準液與樣品同運行,根據樣品與标準品吸光

    度值的高低比較,判斷(duàn)樣品濃度值是小於(yú)還是大於(yú)标準值。

    儀器半定量測(cè)定:首先選擇一個适當(dāng)的标準液與樣品同運行,根據樣品與标準品顔色

    深淺比較,判斷(duàn)樣品濃度值是小於(yú)還是大於(yú)标準值。