本試劑(jì)盒僅(jǐn)供研究使用。 兔p物質（SP）ELISA試劑盒使用目的： 本試劑盒用於(yú)測(cè)定兔血清 、血漿及相關液體樣本中p物質（SP）含量。 兔p物質（SP）ELISA試劑盒實驗原理 本試劑盒應用雙抗體夾心法測(cè)定标本中兔p物質（SP）水平 。用純化的兔p物質（SP）抗體包被微孔闆，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入p物質（SP），再與HRP标記的p物質（SP）抗體結合，形成抗體-抗原-酶标抗體複合物 ，經過*洗滌後加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，並(bìng)在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顔色的深淺和樣品中的p物質（SP）呈正相關。用酶标儀在450nm波長下測(cè)定吸光度（OD值），通過标準曲線計算樣品中兔p物質（SP）濃度 。 兔p物質（SP）ELISA試劑盒組成
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1
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30倍濃縮洗滌液
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20ml×1瓶
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7
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終止液
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6ml×1瓶
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2
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酶标試劑
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6ml×1瓶
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8
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标準品（800ng/L）
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0.5ml×1瓶
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3
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酶标包被闆
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12孔×8條
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9
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标準品稀釋液
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1.5ml×1瓶
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4
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樣品稀釋液
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6ml×1瓶
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10
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說明書
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1份
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5
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顯色劑A液
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6ml×1瓶
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11
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封闆膜
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2張
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6
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顯色劑B液
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6ml×1/瓶
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12
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密封袋
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1個
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兔p物質（SP）ELISA試劑盒操作步驟 1. 标準品的稀釋：本試劑盒提供原倍标準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
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400ng/L
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5号标準品
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150μl的原倍标準(zhǔn)品加入150μl标準(zhǔn)品稀釋(shì)液
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200ng/L
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4号标準品
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150μl的5号标準(zhǔn)品加入150μl标準(zhǔn)品稀釋(shì)液
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100ng/L
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3号标準品
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150μl的4号标準(zhǔn)品加入150μl标準(zhǔn)品稀釋(shì)液
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50ng/L
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2号标準品
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150μl的3号标準(zhǔn)品加入150μl标準(zhǔn)品稀釋(shì)液
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25ng/L
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1号标準品
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150μl的2号标準(zhǔn)品加入150μl标準(zhǔn)品稀釋(shì)液
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2. 加樣：分别設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶标試劑，其餘各步操作相同）、标準孔 、待測樣品孔。在酶标包被闆上标準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然後再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度爲5倍）。加樣将樣品加於酶标闆孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。 3. 溫育 ：用封闆膜封闆後置37℃溫(wēn)育30分鍾(zhōng)。 4. 配液 ：将20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋後備用 5. 洗滌：小心揭掉封闆膜，棄去液體 ，甩幹 ，每孔加滿洗滌液，靜置30秒後棄去，如此重複5次，拍幹。 6. 加酶：每孔加入酶标試劑50μl，空白孔除外。 7. 溫育 ：用封闆膜封闆後置37℃溫(wēn)育30分鍾(zhōng)。 8. 洗滌：小心揭掉封闆膜，棄去液體，甩幹 ，每孔加滿洗滌(dí)液，靜置30秒後棄去，如此重複(fù)5次，拍幹。 9. 顯色 ：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鍾. 10. 終止 ：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。 11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液後15分鍾以内進行。
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