檢測原理：
本試劑盒應用雙抗體夾心法測(cè)定标本中人白細胞介素6(IL-6)水平 。用純化的人白細胞介素6(IL-6)抗體包被微孔闆，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入人白細胞介素6(IL-6)，再與HRP标記的人白細胞介素6(IL-6)抗體結合，形成抗體-抗原-酶标抗體複合物 ，經過che底洗滌後加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，並(bìng)在酸的作用下轉化成最終的黃色 。顔色的深淺和樣品中的人白細胞介素6(IL-6)呈正相關。用酶标儀在450nm波長下測(cè)定吸光度（OD值），通過标準曲線計算樣品中人白細胞介素6(IL-6)濃度。
操作步驟 ：
1.标準品的稀釋：本試劑(jì)盒提供原倍标準品一支，用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2.加樣：分别設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶标試劑，其餘各步操作相同）、标準孔、待測樣品孔。在酶标包被闆上标準品準確(què)加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然後再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度爲5倍）。加樣将樣品加於(yú)酶标闆孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.溫(wēn)育：用封闆膜封闆後(hòu)置37℃溫(wēn)育30分鍾。
4.配液 ：将30倍濃縮洗滌(dí)液用蒸餾水30倍稀釋後備(bèi)用。
5.洗滌(dí) ：小心揭掉封闆膜，棄去液體 ，甩幹，每孔加滿洗滌(dí)液，靜置30秒後棄去，如此重複(fù)5次 ，拍幹。
6.加酶 ：每孔加入酶标試(shì)劑(jì)50μl，空白孔除外。
7.溫(wēn)育：用封闆膜封闆後(hòu)置37℃溫(wēn)育30分鍾。
8.洗滌(dí)：小心揭掉封闆膜，棄去液體，甩幹 ，每孔加滿洗滌(dí)液 ，靜置30秒後棄去，如此重複(fù)5次 ，拍幹。
9.顯色：每孔先加入顯色劑(jì)A50μl，再加入顯色劑(jì)B50μl，輕輕震蕩(dàng)混勻，37℃避光顯色10-20分鍾。
10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍(lán)色立轉黃(huáng)色）。
11.測(cè)定：以空白孔調零 ，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應在加終止液後15分鍾以内進行。
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