近期開始，衆多從事醫學 、生命科學、動物學 、植物學等碩士研究生即将迎來他們的畢(bì)業課題。其中不乏有真正沒有自己獨立操作過ELISA實驗的新手。而即将迎來的畢(bì)業課題将又不得不靠自己獨立完成 。在此。我司技術部歐陽技術總結ELISA實驗操作易走的誤區 。希望能夠幫(bāng)助到廣大科研新手順利完成實驗、順利畢(bì)業 。
①：液體全部加入酶标孔後(hòu) ，将酶标闆放在桌子上平行輕(qīng)輕(qīng)搖晃30s，使液體充分混合均勻，也使其得到充分的反應。
②：盡量做雙孔實驗，這樣才既能保證數據的準確(què)性 ，又能反映出試劑(jì)盒的精密度。
③：手工洗闆時每次加入洗滌(dí)液後 。應靜置15～30s，不要将一個酶标孑L中的洗滌(dí)液濺入另一酶标孔中 ，防止交叉污染 。甩去洗滌(dí)液後将酶标闆放在毛巾或吸水紙上拍幹(gàn) 。
④：将液體加到酶标孔中時，避免槍頭和孔内液體接觸(chù) ，可使槍頭上的液滴和孑L壁接觸(chù)，液滴會自然流下去。吸入液體時的的方法是吸兩檔打一檔，防止由於(yú)槍頭的毛細作用使得部分液體不能流出而造成的誤差。
⑤：由於(yú)底物顯色劑對(duì)光及其敏感，因此要避光保存。
⑥：底物爲TMB，避免與皮膚(fū)相接觸(chù) 。終止液爲2tool的濃硫酸具有腐蝕性，應盡量避免接觸(chù)皮膚(fū)。
⑦：要確(què)保微量加樣器的準確(què)性，可以使用蒸餾水和電子天平進行確(què)定(由於(yú)蒸餾水不含雜質，溫度環境爲20%左右時，lmL的水可以看作是lg、20L的水可以看作是0.2g)每一把微量加樣器都應該将其zui高量程和zui低量程進行確(què)定。
⑧：實驗前30min将試劑(jì)盒中的所有試劑(jì)從(cóng)冰箱取出，使試劑(jì)盒中的所有試劑(jì)與提取好的樣品溶液的溫度相同，酶标闆隻要取出所需量。
⑨：孵育時要使蓋(gài)闆膜封好酶标闆，防止水分蒸發(fā)，以防曲線不成線性。
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