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雙抗體夾心法檢測HBsAg試劑盒

  • 發布日期:2016-07-12      浏覽次數:1945
    • 關鍵詞:HBsAg試劑盒ELISA 簡介:ELISA法定量測定人血清、血漿或其它相關液體中ACA IgA含量。 産品報價說明: 産品名稱:HBsAg試劑盒ELISA 規格:96T/48T 運輸:2~8°保存運輸 服務:提供免費代測服務,提供。

      以已知抗體(抗HBs)包被載體,然後(hòu)将含有抗原的待檢标本加入,共同孵育後(hòu),抗原結合於(yú)包被抗體上,再加入酶标記特異抗體(酶标抗HBs),酶标抗體連接到抗原上,zui後(hòu)加入底物溶液,根據顔色反應來判定抗原含量。

      使用目的:
      本試劑盒用於測定人血清,血漿及相關液體樣本中乙肝表面抗原ELISA試劑盒(HBsAg)含量。
      實驗原理
      本試劑盒應用間接法測定标本中人乙肝表面抗原(HBsAg)水平 。用純化的人乙肝表面抗原(HBsAg)抗體包被微孔闆,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入已知濃度的乙肝表面抗原(HBsAg)标準品和未知濃度的HBsAg待檢樣品,溫育後,加入生物素标記的抗IgG抗體 ,再與鏈黴親和素-HRP結合,形成免疫複合物,經過*洗滌後加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,並在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顔色的深淺和樣品中的乙肝表面抗原(HBsAg)呈正相關。用酶标儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過标準曲線計算樣品中人乙肝表面抗原(HBsAg)濃度。

      一、材料

      HBsAg試(shì)劑(jì)盒,本試(shì)劑(jì)盒含: 

      1、包被抗-HBs反應(yīng)條(tiáo) 1瓶

      2、酶結(jié)合物 1瓶

      3、HBsAg陽(yáng)性對(duì)照 1瓶

      4、HBsAg陰(yīn)性對(duì)照 1瓶

      5、洗滌(dí)液:用前每瓶作1:20稀釋(shì) 1瓶

      6、顯(xiǎn)色劑(jì)(TMB)A 1瓶

      7、顯(xiǎn)色劑(jì)(TMB)B 1瓶

      8、終(zhōng)止液 1瓶

      二、方法

      1、加入待測(cè)标本每孔0.05ml,並(bìng)設HBsAg陽性對照2孔,HBsAg陰性對照2孔,空白對照1孔,然後加入酶結合物每孔1滴(0.05ml、空白對照孔不加),充分混勻後置37℃孵育30分鍾 。

      2、洗闆:棄去反應條孔内液體、拍幹、用洗滌(dí)液注滿每孔,棄去拍幹 ,反複(fù)五次後拍幹 。

      3、顯色劑(jì):先加顯色劑(jì)A每孔1滴(0.05ml),然後(hòu)再加顯色劑(jì)B每孔1滴(0.05ml),混勻,37℃孵育10分鍾。

      4、每孔加終(zhōng)止液1滴(0.05ml),混勻(yún)。

      三、結果

      比色法:波長(zhǎng)450nm,先用空白孔校零點(diǎn),然後讀取各孔光密度值 。

      樣品OD值/陰性對(duì)照平均OD值≥ 2.1判斷(duàn)爲陽性,否則爲陰性。

      備(bèi)注:陰性對照平均OD值低於(yú)0.05作0.05計算,高於(yú)0.05按實際OD值計算。陽性對照OD值≥0.8,實驗結果有效。 

      四、注意事項

      1、試(shì)劑(jì)盒置2℃~8℃保存。

      2、使用前試劑應搖勻,並(bìng)棄去1~2滴後(hòu)垂直滴加。

      3、從冷藏環境中取出試劑盒内全部瓶裝試劑及待測标本所需微孔條,置室溫平衡30分鍾後再行測試,餘者應及時封存於(yú)冰箱中以備(bèi)後用。

      4、待測(cè)标本不可用NaN3防腐。

      5、不同批号試劑(jì)請(qǐng)勿通用。

      6、結(jié)果判斷(duàn)須在10分鍾内完成。

      7、若濃縮洗滌(dí)液出現結(jié)晶時,請置37℃至溶解。