ELISA試劑(jì)盒 ELISA檢測(cè)試劑(jì)盒 ELISA KIT
産品名稱:小鼠血清澱粉樣蛋白A試劑盒
英文名稱(chēng):Mouse Serum amyloid A,SAA ELISA KIT
使用範圍:科研
産品規格:96人份/48人份
各種種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛、羊…
标本齊全:血清、血漿、細胞培養上清液、組織勻漿、組織液、關節液、胸腔溢液等…
經營品牌:美國RD RB IBL
保存條件:2-8℃
有效期:6個月
運輸條件:低溫運輸,用幹冰或者冰袋低溫運輸。
小鼠血清澱粉樣蛋白A試劑盒 加樣
在ELISA中一般有3次加樣步聚,即加标本,加酶結合物,加底物。加樣時應将所加物加在LEISA闆孔的底部,避免加在孔壁上部,並注意不可濺出,不可産生氣泡。 加标本一般用微量加樣器,按規定的量加入闆孔中。每次加标本應更換吸嘴,以免發生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。有此測定(如間接法ELISA)需用稀釋的血清,可在試管中按規定的稀釋度稀釋後再加樣。也可在闆孔中加入稀釋液,再在其中加入血清标本,然後在微型震蕩器上震蕩1分鍾以保證混和。加酶結合物應用液和底物應用液時可用定量多道加液器,使加液過程迅速完成。
保溫
在ELISA中一般有兩次抗原抗體反應,即加标本和加酶結合物後。抗原抗體反應的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱爲溫育(incubation),有人稱之爲孵育,在ELISA中似不恰當。ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的結合隻在固相表面上發生。以抗體包被的夾心法爲例,加入闆孔中的标本,其中的抗原並不是都有均等的和固相抗結合的機會,隻有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程,因此需經擴散才能達到反應的終點。在其後加入的酶标記抗體與固相抗原的結合也同樣如此。這就是爲什麽ELISA反應總是需要一定時間的溫育。溫育常採用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數抗原抗體結合的合适溫度。在建立ELISA方法作反應動力學研究時,實驗表明,兩次抗原抗體反應一般在37℃經1-2小時,産物的生成可達。爲加速反應,可提高反應的溫度,有些試驗在43℃進行,但不宜採用更高的溫度。抗原抗體反應4℃更爲*,在放射免疫測定中多使反應在冰箱中過夜,以形成zui多的沉澱。但因所需時間太長,在ELISA中一般不予採用。保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,一般均採用水浴,可将ELISA闆置於水浴箱中,ELISA闆底應貼著水面,使溫度迅速平衡。爲避免蒸發,闆上應加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋闆孔,此時可讓反應闆漂浮在水面上。若用保溫箱,ELISA闆應放在濕盒内,濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,zui後将ELISA闆放在濕紗布上。濕盒應先放在保溫箱中預溫至規定的溫度,特别是在氣溫較低的時候更應如此。無論是水浴還是濕盒溫育,反應闆均不宜疊放,以保證各闆的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應,操作時的室溫應嚴格限制在規定的範圍内,标準室溫溫度是指20-25℃,但具體操作時可根據說明書的要求控制溫育。室溫溫育時,ELISA闆隻要平置於操作台上即可。應注意溫育的溫度和時間應按規定力求準確。爲保證這一點,一個人操作時,一次不宜多於兩塊闆同時測定。
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