兔子組織型纖溶酶原激活劑 檢測試劑盒 elisa實驗
産品名稱:兔子組織型纖溶酶原激活劑 EELISA試劑盒
英文名稱(chēng):rabbit Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA KIT
産品包裝:48T/96T
保存條件:2-8℃
試驗原理:
IL-1試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知IL-1濃度的标準品、未知濃度的樣品加入微孔酶标闆内進行檢測。先将IL-1和生物素标記的抗體同時溫育。洗滌後,加入親和素标記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然後加入底物A、B,和酶結合物同時作用。産生顔色。顔色的深淺和樣品中IL-1的濃度呈比例關系。
操作步驟:
1.使用前,将所有試劑充分混勻。不要使液體産生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,産生加樣上的誤差。
2.根據待測樣品數量加上标準品的數量決定所需的闆條數。每個标準品和空白孔建議做複孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用複孔的盡量做複孔。
3.加入稀釋好後的标準品50ul於反應孔、加入待測樣品50ul於反應孔内。立即加入50ul的生物素标記的抗體。蓋上膜闆,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4.甩去孔内液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍幹。重複此操作3次。如果用洗闆機洗滌,洗滌次數增加一次。
5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鍾。
6.甩去孔内液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍幹。重複此操作3次。如果用洗闆機洗滌,洗滌次數增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鍾。避免光照。
8.取出酶标闆,迅速加入50ul終止液,加入終止液後應立即測定結果。
9.在450nm波長處測定各孔的OD值。
試劑盒性能:
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小於1号标準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值爲0.990。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
3. 重複性:闆内、闆間變異系數均小於10%。
結果 判 斷 與 分 析:
1、儀器值:於波長450nm的酶标儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值爲縱坐标(Y),相應的IL-1标準品濃度爲橫坐标(X),做得相應的曲線,樣品的IL-1含量可根據其OD值由标準曲線換算出相應的濃度。
3、檢測值範圍:0-800pg/ml
4、敏感度: 1.0 pg/ml
兔子組織型纖溶酶原激活劑 檢測試劑盒 elisa實驗